斑马鱼胚胎中Cre/lox介导的定点整合

来源 :高技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wd1219981997

【摘要】

：

采用两种类型的lox突变体和双色荧光报告基因,构建了双交换载体pCMVlox66-CreintEGFPlox2272和plox71RFPlox2272。将Cre酶基因插入载体pCS2＋,获得了体外转录模板质粒pCSCre。

【作者】

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秦瑶汪亚平胡炜朱作言

【机构】

：

中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室,中国科学院研究生院

【出处】

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高技术通讯

【发表日期】

：

2007年10期

【关键词】

：

CRE重组酶斑马鱼定点整合盒式交换 Cre recombinase zebra_fish site-specific recombination c

【基金项目】

：

973计划（2001CB109006）和国家自然科学基金（30130050）资助项目.

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采用两种类型的lox突变体和双色荧光报告基因,构建了双交换载体pCMVlox66-CreintEGFPlox2272和plox71RFPlox2272。将Cre酶基因插入载体pCS2＋,获得了体外转录模板质粒pCSCre。为检测Cre重组酶对斑马鱼胚胎发育的影响,将体外转录的Cre RNA稀释至不同浓度并分别注射入斑马鱼受精卵。结果显示,当Cre RNA浓度高于200ng/μL时会导致高死亡率和高畸形率;而浓度低于100ng/μL的Cre RNA对胚胎发育不造成影响。进一步将50ng/μL的Cre RNA

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