维甲酸对异位内膜基质细胞Beclin-1的影响研究

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目的探讨不同剂量维甲酸(RA)对正常子宫内膜基质细胞和异位内膜基质细胞(ESC)Beclin-1的影响。方法体外培养正常子宫内膜基质细胞和ESC,分为空白对照组(正常子宫内膜基质细胞),氯喹(CQ)组(ESC),CQ+RA组(ESC)。分别采用RT-PCR及Western blot检测各组LC3-Ⅱ、Beclin-1mRNA及蛋白的表达量,PCR及Western blot检测RA作用于CQ或转染siRNA Beclin-1处理的细胞中Beclin-1表达的变化,MTT法检测RA细胞毒性。结果 CQ组LC3-Ⅱ、Beclin-1mRNA表达较空白对照组减少,CQ+RA组较CQ组增加,差异有统计学意义(P<0.05);CQ+RA组与空白对照组LC3-ⅡmRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。随着RA浓度的增加,ESC Beclin-1表达逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。siRNA Beclin-1在确定的转染条件下可有效沉默ESC的Beclin-1基因表达,RA可解除siRNA对Beclin-1的沉默作用。不同浓度RA对细胞的存活率与对照组比较,差异无统计学差异(P>0.05)。结论 RA可以诱导ESC中自噬的发生,升高ESC Beclin-1的表达,且与刺激浓度呈正相关。
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