【摘 要】
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目的 通过基因重组的方法制备人血清对氧磷酶1的R/Q亚型同工酶(rhPON1R/Q192),并比较两种酶作为有机磷中毒解毒剂的效果差异.方法 通过昆虫杆状病毒蛋白表达体系获得rhPON1R/
【机 构】
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沈阳医学院附属中心医院急诊科,辽宁沈阳,110024;中国医科大学附属盛京医院,辽宁沈阳,110022
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目的 通过基因重组的方法制备人血清对氧磷酶1的R/Q亚型同工酶(rhPON1R/Q192),并比较两种酶作为有机磷中毒解毒剂的效果差异.方法 通过昆虫杆状病毒蛋白表达体系获得rhPON1R/Q192.将30只60日龄的雄性昆明种小鼠随机分成染毒对照组、染毒治疗A组、染毒治疗B组,每组10只.将对氧磷按2倍LD50(1.72 mg/kg)的剂量,对各组小鼠采用经口灌胃的方式染毒.而后立即将纯化的rhPON1R192和rhPON1Q192作为解毒剂,按10 U/kg的剂量采用腹腔注射方式分别予A、B染毒治疗组小鼠.连续观察12h,记录并比较各组小鼠中毒指标的差异,评价rhPON1R/Q192的解毒效果.结果 通过基因重组的方法可以大量获得具有对氧磷水解活性的rhPON1R/Q192,其中rhPON1R192的产率为8.34％,比活性为1 552.31 U/mg;rhPON1Q192的产率为10.60％,比活性为581.60 U/mg.对照组小鼠在观察期内均出现了中毒症状,死亡率为100％.染毒治疗A、B组小鼠出现中毒症状、De Bleeker评分达到3分及死亡时间均明显延迟(P＜0.05);两组的死亡率分别是10％和20％,较对照组明显下降(P＜0.05).A组的各项指标均明显好于B组(P＜0.05).结论 通过基因重组方法获取的rhPON1R/.192,可用作对氧磷中毒的解毒剂,且R亚型同工酶解毒效果更好.
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