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本实验旨在观察海兔素对酒精性肝损伤大鼠的保护作用,并从内毒素介导的Kupffer细胞toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)信号通路角度探讨海兔素可能的保肝机制。雄性Wistar大鼠随机分为三组,包括正常对照组、酒精模型组和海兔素干预组。其中,酒精模型组和海兔素干预组大鼠分别灌胃给予8g/kg/d酒精2周后,再给予12 g/kg/d酒精6周。海兔素干预组在给予酒精前1h,灌胃给予海兔素150 mg/kg/d,持续8周。末次灌胃后,禁食不禁水12h,处死大鼠。采用HE染色进行肝组织病理学观察,采用透射电镜进行肝组织超微结构观察,采用酶学实验检测肝脏损伤血清生物标志物水平,采用显色底物鲎试剂盒检测血清内毒素水平;采用门静脉胶原酶Ⅳ原位灌注及密度梯度离心获得大鼠原代Kupffer细胞。采用墨汁吞噬试验评价kupffer细胞吞噬活性;采用逆转录聚合酶链反应(Reversed transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)测定Kupffer细胞中CD14、TLR4和NF-κB的m RNA表达水平;采用蛋白印迹实验(Western blotting)测定Kupffer细胞中TLR4、MYD88、(NF)-κB p65和TNF-α的蛋白表达水平;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定Kupffer细胞上清液中TNF-α和IL-1β含量。结果显示,海兔素补充可减轻酒精引起的肝组织损伤,降低肝脏损伤血清生物标志物水平(P<0.05)。进一步研究发现,海兔素补充可减少血浆内毒素含量(P<0.05),有效恢复Kupffer细胞吞噬活性,显著降低Kupffer细胞中TLR4及其下游CD14、TLR4、MYD88、(NF)-κB p65等相关蛋白表达水平(P<0.05),并使TNF-α和IL-1β等炎性因子释放受到抑制(P<0.05)。结果表明,海兔素对酒精性肝损伤大鼠肝组织具有保护作用,其作用机制可能与海兔素抑制内毒素介导的MyD88依赖性TLR4信号通路活化有关。