肺炎支原体P1蛋白结构基因片段的制备及C末端基因片段克隆的研究

来源 :中国人兽共患病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qinghuawuqiong
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目的制备肺炎支原体P1蛋白结构基因,并在大肠杆菌中克隆肺炎支原体P1蛋白C末端基因片段,为P1蛋白基因片段的扩增、表达及探讨C末端基因片段功能打基础。方法 PCR扩增方法获取P1结构基因。扩增产物用P1蛋白基因特异引物扩增鉴定。用Sal Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶酶切消化方法制备P1蛋白C末端基因片段,并与pUC19 DNA连接,转入大肠杆菌JM109菌株。用X-gal 平板及质粒图谱分析方法筛选重组克隆株,再用限制性核酸内切酶酶切图谱分析鉴定。结果经PCR扩增MP DNA 获得一条5.0 kb DNA片段,用
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