【摘 要】
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[目的] 敲除布洛芬福斯质粒文库克隆菌株4F6中的邻苯二酚-2,3-双加氧酶基因(C23O),构建其Tn5插入突变体,为布洛芬降解调节因子的深入研究奠定基础。[方法] 以构建好的3G7Tn5突
【机 构】
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西北农林科技大学生命科学学院,西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室,西北农林科技大学旱区生物质能研究中心,西北农林科技大学资源环境学院,陕西师范大学生命科学学院
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(31070453), 陕西省国际科技合作项目(2013KW-29), 西北农林科技大学科技创新专项(QN2011113),西北农林科技大学国际科技合作项目(A213021311)
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[目的] 敲除布洛芬福斯质粒文库克隆菌株4F6中的邻苯二酚-2,3-双加氧酶基因(C23O),构建其Tn5插入突变体,为布洛芬降解调节因子的深入研究奠定基础。[方法] 以构建好的3G7Tn5突变体菌株为基础,借助pKD46质粒的λ-red同源重组酶,将转座子Tn5从菌株3G7中电击转化至4F6,消除pKD46质粒,敲除4F6菌株中的C23O基因,测定出发菌株3G7、4F6及Tn5插入突变体菌株3G7-G9、3G7-H5、4F6-G9和4F6-H5间位苯环的裂解活性。[结果] 42℃条件下消除了Tn5插入突
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