【摘 要】
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目的:探讨生物可降解材料聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体负载突变后的高危型人乳头瘤病毒16E7(HPV16E7)蛋白的纳米疫苗诱抗肿瘤的免疫反应。方法:表达并纯化定点突变的HP
【基金项目】
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深圳市科创委基础研究项目资助课题(JCYJ20170307093557440,JCYJ20170307093622283)
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目的:探讨生物可降解材料聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体负载突变后的高危型人乳头瘤病毒16E7(HPV16E7)蛋白的纳米疫苗诱抗肿瘤的免疫反应。方法:表达并纯化定点突变的HPV16 E7蛋白(HPV16mE7)。表征用复乳溶剂挥发法制备的HPV16mE7/PLGA纳米粒。HPV16mE7/PLGA纳米粒皮下免疫C57BL/6(H-2b)小鼠2次,用ELISA检测血清中的抗HPV16E7抗体水平,用Elispot和用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验分别检测产生IFN-γ和CTL反应。结果:Western Blot分析证明HPV16mE7蛋白具有和野生型HPV16E7诱导产生的抗体结合的活性。HPV16mE7/PLGA纳米粒粒径大小为(335.6±6.32)nm,Zeta电位为(-6.9±0.41)mV,包封率为62.4%,体外释放呈双相动力学特征,于第9天累积释放达58.2%,纳米悬液在4℃至少稳定1个月。HPV16mE7/PLGA纳米粒免疫的小鼠血清抗E7抗体水平、CTL和产生IFN-γ细胞显著高于HPV16mE7免疫组的小鼠。结论:HPV16mE7/PLGA纳米疫苗具有较单纯的HPV16mE7诱导小鼠产生更强的体液和细胞免疫反应。HPV16mE7/PLGA纳米疫苗可作为HPV16感染相关疾病候选疫苗。
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