【摘 要】
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目的 用蛋白片段互补法(PCA)选择HBV多聚酶末端蛋白(TP)重链可变区(VH)抗体,研究特异性VH抗体体外抑制HBV的复制与分泌.方法 以HBV多聚酶TP区为抗原,用PCA法进行特异性VH抗体
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目的 用蛋白片段互补法(PCA)选择HBV多聚酶末端蛋白(TP)重链可变区(VH)抗体,研究特异性VH抗体体外抑制HBV的复制与分泌.方法 以HBV多聚酶TP区为抗原,用PCA法进行特异性VH抗体筛选.特异性VH抗体基因定向亚克隆人真核表达载体pZeoSV2(+),构建pZeoSV2(+)-VH重组质粒,用脂质体介导的转染技术,将其导入HepG 2.2.15细胞,观察特异性抗体的生物学活性.结果 用PCA法从抗体库中选择出3个特异性抗体:VH1、VH2和VH3,其中与抗原亲和力最高的是VH1.转染pZeoSV2(+)-VH1的HepG 2.2.15细胞比未转染pZeoSV2(+)-VH1或只转染空载体pZeoSV2(+)的HepG 2.2.15细胞病毒颗粒分泌明显减少,上清液内为2.978 7±0.276 1比5.150 4±0.276 1和5.295 1±0.241 0(P＜0.05);细胞内为5.283 9±0.162 9比8.300 4±0.323 2和8.532 1±0.138 3(P＜0.05).结论 用PCA法可从抗体库中选择出HBV多聚酶TP区特异性VH抗体,该抗体在体外可抑制HBV的复制与分泌.
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