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目的构建以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）为报告基因的脑源性神经营养因子（BDNF）融合蛋白真核表达质粒，并对其表达和定位进行研究。方法以人血白细胞DNA为模板，利用一对删除终止密码子的引物进行PCR获得BDNF基因片段，并将其与pEGFP—N1质粒载体连接，构建BDNF-EGFP融合蛋白真核表达质粒。以脂质体Lipofectamine2000转染Hela细胞，提取总RNA，通过RT—PCR方法检测BDNF-EGFP在转录水平的表达，Western blot及荧光显微镜进一步观察融合蛋白的表达定位。结果酶切