【摘 要】
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采用玻璃针分离法,通过显微操作系统成功地分离到西瓜（2n=22）的第一单染色体,将分离到的西瓜染色体放入0.2mL Eppendorf管中,经去蛋白,Sau3A酶切,并在染色体DNA片段两端加上Sau
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采用玻璃针分离法,通过显微操作系统成功地分离到西瓜（2n=22）的第一单染色体,将分离到的西瓜染色体放入0.2mL Eppendorf管中,经去蛋白,Sau3A酶切,并在染色体DNA片段两端加上Sau3A人工接头后,进行两轮PCR扩增,得到0.4～2.0kb之间的DNA片段。用西瓜的基因组标记成探针,与单染色体扩增产物进行Southern杂交,表明这些西瓜单染色体扩增片段与西瓜基因组DNA之间有同源性,从而证明单染色体DNA确实已被成功地扩增。将第2轮PCR产物构建质粒文库,得到约20000个重组子。这是
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