趋化因子受体7小干扰RNA对人头颈部鳞状细胞癌细胞增殖及侵袭的影响

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目的 研究趋化因子受体7(chemokine receptor7,CCR-7)小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)高表达的人头颈部鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma of head and neck,SCCHN)细胞系PCI-4B增殖和侵袭能力的影响,探讨siRNA技术在SCCHN基因治疗中的可行性和特异性.方法 选用阳离子脂质体LipofectamineTM 2000作为转染试剂,将针对人CCR-7基因的siRNA转染PCI-4B,采用Western blotting法检测CCR-7蛋白水平,应用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测转染前后细胞增殖变化,应用激光共聚焦显微镜观察细胞的改变,Transwell趋化小室法检测细胞体外侵袭能力的改变,并通过荧光显微镜及TransAMTM细胞核因子西乙蛋白(nuclear favor-kappa B,NF-Κb)p65活性检测试剂盒检测NF-Κb细胞内定位及活性.结果 CCR-7 siRNA转染后,细胞内CCR-7蛋白表达水平显著降低(P<0.05);CCL-19诱导使SCCHN细胞增殖能力增高,细胞极性浓聚、迁移和侵袭能力增高、NF-Κb活化及核转位,这些效应均被CCR-7 siRNA抑制.结论 CCR-7 siRNA在体外成功地下调CCR-7的蛋白水平,抑制了CCL-19增强PCI-4B增殖能力和迁移能力的效应,为临床SCCHN的治疗提供了新方法。

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