【摘 要】
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利用PCR方法扩增鲤疱疹病毒Ⅱ型（CyHV-2）ORF25基因的部分基因序列,并将扩增产物连接到原核表达载体pGEX-KG,成功构建了CyHV-2-ORF25-KG重组质粒。IPTG将其诱导后,SDS-PAGE分析
【机 构】
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华中农业大学水产学院/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心,中国水产科学研究院长江水产研究所
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利用PCR方法扩增鲤疱疹病毒Ⅱ型（CyHV-2）ORF25基因的部分基因序列,并将扩增产物连接到原核表达载体pGEX-KG,成功构建了CyHV-2-ORF25-KG重组质粒。IPTG将其诱导后,SDS-PAGE分析表明：目的蛋白得到表达,分子质量大小为42ku,且主要以包涵体形式存在;用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,多次免疫后通过细胞融合,筛选出1株单抗5C6;经间接免疫荧光试验和Western blot试验验证,这株单抗可以识别CyHV-2ORF25蛋白。
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