【摘 要】
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以黄鳝F64基因序列为模板设计引物,扩增用于c RNA探针合成的模板,构建F64/p GM-T重组质粒并线性化,利用RNA聚合酶体外转录合成正、反义c RNA探针,并对其进行地高辛标记,利用
【机 构】
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广西师范大学生命科学学院,上海海洋大学水产与生命科学学院,桂林理工大学博文管理学院,泗阳县水产技术指导站
【基金项目】
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广西师范大学实验室管理创新与技术革新项目（2014GJ02）, 上海高校知识服务平台上海海洋大学水产动物遗传育种中心基金资助项目（ZF1206）
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以黄鳝F64基因序列为模板设计引物,扩增用于c RNA探针合成的模板,构建F64/p GM-T重组质粒并线性化,利用RNA聚合酶体外转录合成正、反义c RNA探针,并对其进行地高辛标记,利用原位杂交方法检测F64基因在黄鳝性腺发育过程中的表达变化情况。结果显示,正义探针未检测到阳性信号,反义探针检测到该基因在黄鳝性腺发育早期不表达,于V期性腺开始表达。研究结果表明,体外转录法可以有效合成c RNA探针,制备的c RNA探针可以准确检测F64基因的时空表达。
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