【摘 要】
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旨在月季中建立高效、快速的VIGS实验技术体系,以期能够改进VIGS技术体系在月季等木本植物表达效率低等缺陷。采用RT-PCR方法进行月季RhPDS基因片段的克隆,在以pTRV2为原载体
【机 构】
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北京农学院园林学院,城乡生态环境北京实验室,北京市乡村景观规划设计工程技术研究中心
【基金项目】
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北京市教育委员会2015年科技计划面上项目（KM201510020011）
论文部分内容阅读
旨在月季中建立高效、快速的VIGS实验技术体系,以期能够改进VIGS技术体系在月季等木本植物表达效率低等缺陷。采用RT-PCR方法进行月季RhPDS基因片段的克隆,在以pTRV2为原载体,采用双酶切的方法构建了pTRV2-RhPDS重组载体。经双酶切及测序验证后,通过电击法转化农杆菌GV3101,并分别采用高压喷枪法对月季植株进行侵染、采用真空渗透法对扦插苗以及组培苗进行侵染。采用qRT-PCR方法分析RhPDS基因的表达。结果显示:构建的重组载体pTRV2-RhPDS,经双酶切验证,显示条带单一清晰,符合预期目标。在侵染方法和材料上,采用真空渗透法侵染组培苗是最为快速、高效的方式。该试验获得了较为高效、快速VIGS技术体系,提高了VIGS技术体系在月季上表达效率。
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