【摘 要】
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目的利用显微注射技术注射敲除Txnip基因的TALEN mRNA获得TXNIP敲除小鼠。方法在线设计Txnip敲除位点,构建TALEN载体并在细胞水平验证剪切活性,体外转录TALENs成mRNA并通过显
【机 构】
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浙江省医学科学院浙江省实验动物中心,深圳华大基因研究院
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目的利用显微注射技术注射敲除Txnip基因的TALEN mRNA获得TXNIP敲除小鼠。方法在线设计Txnip敲除位点,构建TALEN载体并在细胞水平验证剪切活性,体外转录TALENs成mRNA并通过显微注射技术注射到C57BL/6J小鼠受精卵,对F0代小鼠进行DNA水平鉴定获得TXNIP敲除小鼠。结果在Txnip第一外显子上设计了TALEN识别剪切位点,并在细胞水平验证具有剪切活性,注射mRNA到受精卵获得了4只敲除小鼠,其中2只Txnip发生移码突变,成功制备了TXNIP敲除小鼠。结论通过注射TALE
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