【摘 要】
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为了制备安全、高效的重组鸡γ-干扰素及抗血清,以PCR方法从活化的鸡外周血淋巴细胞中扩增鸡γ-干扰素的成熟肽基因序列,并构建原核表达质粒pET32a-γ和pGEX6p-γ;SDS-PAGE法
【基金项目】
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2012年江苏畜牧兽医职业技术学院重点支持项目(ZD1204), 2010年江苏省教育厅科研成果产业化推进项目(JHZD09-71), 江苏畜牧兽医职业技术学院博士启动基金项目(ZD200908)
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为了制备安全、高效的重组鸡γ-干扰素及抗血清,以PCR方法从活化的鸡外周血淋巴细胞中扩增鸡γ-干扰素的成熟肽基因序列,并构建原核表达质粒pET32a-γ和pGEX6p-γ;SDS-PAGE法检测2个载体特异性表达成熟肽的情况;将纯化的pET32a-γ诱导表达产物免疫小鼠,收获小鼠血清,并以pGEX6p-γ诱导表达产物检测其中特异性抗体滴度。结果显示,扩增的鸡γ-干扰素成熟肽基因能成功表达,原核表达产物免疫小鼠可产生特异性抗体,抗体效价为1∶16 000。表明所用的表达系统可以制备安全、高效的重组干扰素,能
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