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目的
探讨不同浓度三氧化矿物聚合物(MTA)对年轻恒牙牙髓干细胞(DPSCs)体外增殖分化的影响。
方法从年轻恒牙中分离出牙髓组织,用组织贴块法培养DPSCs,并通过检测干细胞表面标志物STRO-1进行鉴定。制备浓度为0.02、0.20、2.00、20 g/L的MTA浸提液。采用四甲基偶氮噻唑蓝比色法(MTT)检测不同浓度MTA对DPSCs存活率及增殖的影响;加入适宜浓度MTA培养4周后,茜素红染色检测矿化结节形成情况;荧光定量聚合酶链反应(PCR)分别测定适宜浓度MTA培养12、24、36、48 h后碱性磷酸酶(ALP)、骨涎蛋白、骨钙素、牙本质涎蛋白(DSP)mRNA的表达。
结果免疫荧光显示干细胞表面标志物表达呈阳性。浓度为0.20 g/L的MTA促进DPSCs增殖的活力较强,培养4周后茜素红染色可见有矿化结节形成。作用于DPSCs不同时间后,骨钙素和DSP mRNA的表达水平呈时间依赖性,在48 h内随着时间的增长而上升。而ALP和BSP mRNA的表达水平则是先上升后下降。
结论0.02、0.20、2.00 g/L浓度的MTA能有效地促进年轻恒牙DPSCs增殖,且0.20 g/L MTA能有效地诱导DPSCs向成牙本质细胞分化。