【摘 要】
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目的 探讨miRNA-122-5p是否通过特异性调控人正常肝细胞(LO2)中细胞色素P4503A4(CYP3A4)的表达,从而影响替格瑞洛的代谢.方法 采用LO2进行4组细胞转染实验:miR-122-5p模拟物组、miR-122-5p模拟物阴性对照组、miR-122-5p抑制剂组、miR-122-5p抑制剂阴性对照组.通过蛋白质印迹和实时聚合酶链反应鉴定CYP3A4蛋白和转录的表达水平.在miR-122-5p模拟物和miR-122-5p抑制剂转染后,采用5μmol/L替格瑞洛刺激LO224 h.通过高效液
【机 构】
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北部战区总医院 心血管内科,辽宁 沈阳110016
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目的 探讨miRNA-122-5p是否通过特异性调控人正常肝细胞(LO2)中细胞色素P4503A4(CYP3A4)的表达,从而影响替格瑞洛的代谢.方法 采用LO2进行4组细胞转染实验:miR-122-5p模拟物组、miR-122-5p模拟物阴性对照组、miR-122-5p抑制剂组、miR-122-5p抑制剂阴性对照组.通过蛋白质印迹和实时聚合酶链反应鉴定CYP3A4蛋白和转录的表达水平.在miR-122-5p模拟物和miR-122-5p抑制剂转染后,采用5μmol/L替格瑞洛刺激LO224 h.通过高效液相质谱联用检测细胞培养基中替格瑞洛及其活性代谢物AR-C124910XX的浓度.结果 在蛋白表达水平方面,与miR-122-5p模拟物阴性对照组相比,miR-122-5p模拟物组CYP3A4的表达降低(P<0.05).与miR-122-5p抑制剂阴性对照组相比,miR-122-5p抑制剂组CYP3A4的表达增加(P<0.05).在转录水平上,与miR-122-5p模拟物阴性对照组相比,miR-122-5p模拟物转染组CYP3A4的表达降低(P<0.05).与miR-122-5p抑制剂阴性对照组相比,miR-122-5p抑制剂组CYP3A4的表达增加(P<0.05).与miR-122-5p模拟物阴性对照组相比,miR-122-5p模拟物组细胞培养基中替格瑞洛的浓度增高,其活性代谢物AR-C124910XX的浓度降低(P<0.05).与miR-122-5p抑制剂阴性对照组相比,miR-122-5p抑制剂组细胞培养基中替格瑞洛的浓度降低,其活性代谢物AR-C124910XX的浓度增加(P<0.05).结论 miR-122-5p参与CYP3A4表达的调控,并影响替格瑞洛的代谢.
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