【摘 要】
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目的 观察靶向survivin基因的siRNA对喉癌细胞Hep-2增殖和凋亡的影响,为喉癌的基因治疗提供有效靶点及技术.方法 使用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将靶向survivin基因的s
【机 构】
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宁波大学医学院,浙江宁波,315211宁波市医疗中心李惠利医院,浙江宁波,315040;
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目的 观察靶向survivin基因的siRNA对喉癌细胞Hep-2增殖和凋亡的影响,为喉癌的基因治疗提供有效靶点及技术.方法 使用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将靶向survivin基因的siRNA转染至喉癌细胞株Hep-2;MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]法检测对喉癌细胞Hep-2增殖的影响;RT-PCR检测喉癌细胞Hep-2 survivin基因mRNA表达的变化;Western Blot检测survivin基因蛋白表达;流式细胞技术检测喉癌细胞Hep-2凋亡情况.结果 各浓度survivin-siRNA转染组细胞增殖抑制率和凋亡率均明显高于对照组(P<0.05),survivin mRNA和蛋白表达有不同程度减弱,并且有明显的浓度依赖性,随着浓度的上升表达率下降.结论 利用RNA干扰技术沉默survivin基因表达可以显著抑制喉癌细胞Hep-2细胞增殖,并在一定程度上诱导其自发凋亡,不同浓度sturvivin-siRNA转染能下调survivin mRNA和蛋白表达,靶向survivin基因的RNA干扰技术在喉癌的基因治疗中具有一定价值.
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