【摘 要】
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采用PCR的方法对AGAP（anti-cancer analgesic peptide,抗癌镇痛肽）的N端进行了基因改造,保留了Kex2初步切割信号序列,去除了Ste13的切割序列,加入了对蝎毒蛋白抗癌镇痛活性无影
【机 构】
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广东食品药品职业学院实训中心,沈阳药科大学生命科学与生物制药学院
【基金项目】
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国家自然科学基金（30772738）, 沈阳市科技局沈阳市药学生物技术重点实验室建设基金（1081102-1-00）
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采用PCR的方法对AGAP（anti-cancer analgesic peptide,抗癌镇痛肽）的N端进行了基因改造,保留了Kex2初步切割信号序列,去除了Ste13的切割序列,加入了对蝎毒蛋白抗癌镇痛活性无影响的氨基酸作为linker。通过构建辅助质粒pPIC6K,避免了kan基因内部的Xho I酶切位点对基因克隆的影响,构建了中介质粒pPIC6K-RGD-4C-His Tag-AGAP,该质粒经BamH I和EcoR I双酶切取得所需DNA片段,与同样经过双酶切的质粒pPIC9K进行连接,最终成功
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