PEDV S蛋白B细胞抗原表位的筛选和鉴定

来源 :中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ZXFAMD
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以猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S基因的免疫优势区S1(1bp~2367 bp)为靶基因,利用基于gIII表达外源多肽的fd丝状噬菌体展示系统,构建S1基因噬菌体展示肽库,以纯化的兔抗PEDV多克隆血清为靶蛋白对S1基因噬菌体展示肽库进行3轮生物淘选,结果获得3个高亲和力的序列,分别命名为S1P1(248aa~280aa)、S1P2(442aa~499aa)和S1P3(697aa~742aa)。ELISA和Western blot结果显示,S1P1、S1P2和S1P3短肽都能被兔抗PEDV多克隆血清识别,其中S1P3反应性最强。为了进一步揭示S1P1、S1P2和S1P3短肽的抗原性,3个短肽GST融合蛋白和它们串连后GST融合蛋白的单因子血清被制备,间接免疫荧光试验(IFA)结果证实,抗S1P2-GST、S1P3-GST和S1P123-GST融合蛋白的单因子血清能够识别Vero细胞培养物中天然的PEDV。
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