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【目的】:研究重组甘精胰岛素注射液Beagle犬皮下重复给药1个月长期毒性试验的不同阶段,检测血清中是否产生抗药结合抗体以及抗体的中和活性;研究其与剂量和时间的相关性;并与参照药进行抗体交叉反应测定,以比对两药免疫原性。根据免疫毒性相关指标综合分析供试品否具有免疫毒性。【方法】:Beagle犬设重组甘精胰岛素注射液低、中、高(0.5、1.0和1.5 IU/kg)三个剂量组、原研对照组(来得时1.5 IU/kg)和溶媒对照组,共5组,每组10只动物(5♀/5♂),每日给药1次,连续给药30天,停药恢复28天。采用间接ELISA法检测给药前、给药期及恢复期不同时间动物血清抗药的结合抗体(BAb)。采用胰岛素生物测定法对产生BAb的血清样品进行抗体中和活性检测(NAb)。结合"重组甘精胰岛素注射液Beagle犬皮下注射1个月长期毒性试验"中相关免疫学指标综合分析供试品的免疫毒性。【结果】:(1)供试品高剂量组和原研对照组各有1只雄性动物,从给药d15开始产生BAb直至恢复期结束,产生结合抗体的动物数比例均为1/10,2只动物的抗体滴度范围分别为1:10～1:160和1:10～1:640,给药期结束d30时抗体滴度最高,分别为1:160和1:640,恢复期逐渐降低至滴度为1:40。(2)其他剂量组受试动物均未检测到BAb;(3)分别包被供试品重组甘精胰岛素注射液和参照药来得时,交叉测定各试验组血清样品,产生BAb的动物比例及抗体滴度基本一致。(4)对产生BAb的血清样本进行抗体中和活性检测结果为非中和活性抗体;(5)免疫毒性相关指标包括,对白细胞总数及分类、骨髓细胞形态及分类、免疫相关脏器重量、系数及组织病理学等指标均无影响。【结论】:重组甘精胰岛素注射液Beagle犬皮下注射给药1个月长期毒性试验中,供试品高剂量组和参照药对照组高剂量组Beagle犬重复皮下给药30天对个别动物具有一定的非中和活性的免疫原性,但无免疫毒性。同剂量下供试品与参照药相比,所产生的BAb结果较为一致,对Beagle犬均具有一定的免疫原性。