【摘 要】
：
近年来,基于纳米医疗技术开发的用于肿瘤治疗或诊断的纳米靶向递送体系取得了巨大进展。纳米靶向递送体系是一类能够定点将药物递送到靶细胞部位,实现精准、高效和安全治疗的纳米材料。目前,研究者构建了多种多样的靶向纳米递送体系,包括脂质体、胶束、聚合物纳米粒、无机纳米粒等,这些靶向纳米递送体系在传递药物用于抗肿瘤研究中展示了巨大的潜力。但大多数纳米靶向递送体系仍面临着靶向效率低、生物相容性差、治疗效果不佳及
论文部分内容阅读
近年来,基于纳米医疗技术开发的用于肿瘤治疗或诊断的纳米靶向递送体系取得了巨大进展。纳米靶向递送体系是一类能够定点将药物递送到靶细胞部位,实现精准、高效和安全治疗的纳米材料。目前,研究者构建了多种多样的靶向纳米递送体系,包括脂质体、胶束、聚合物纳米粒、无机纳米粒等,这些靶向纳米递送体系在传递药物用于抗肿瘤研究中展示了巨大的潜力。但大多数纳米靶向递送体系仍面临着靶向效率低、生物相容性差、治疗效果不佳及释药响应性弱等挑战。因此,有必要开发更安全高效的特异性靶向肿瘤的纳米递送体系,提高肿瘤精准诊断和治疗效果。本论文设计了两种纳米靶向递送体系,分别是基于酶促自组装的线粒体靶向体系用于肿瘤光动力治疗和基于生物正交反应的NK活细胞递送体系用于肿瘤免疫治疗。主要包括以下两部分内容:（1）合成了带磷酸基团的苯丙酪氨酸三肽,用于酶促自组装反应。然后分别利用酰胺化反应将带磷酸基团的苯丙酪氨酸三肽和线粒体靶向基团TPP共价结合到光敏剂二氢卟吩e6（Ce6）上,得到酶促自组装前体分子（Ce6-TPP-Phe-tyr）,并通过质谱、核磁和液相验证了该前体分子的成功构建。Ce6-TPP-Phe-tyr可以实现对肿瘤组织的深层浸润,其上的磷酸基团在肿瘤细胞过表达的碱性磷酸酶触发下,能够在肿瘤部位原位自组装成纤维状纳米胶束。自组装得到的纤维状纳米胶束能够被肿瘤细胞大量摄取,并利用其上的TPP靶向到富氧的线粒体中。在激光照射下,胶束上的Ce6在线粒体中产生大量活性氧（ROS）以杀伤肿瘤细胞。我们利用透射电镜验证了该酶促自组装策略,结果表明Ce6-TPP-Phe-tyr能够在碱性磷酸酶环境中自组装成纤维状纳米胶束。为了研究该体系的光动力抗肿瘤效果,我们分别进行了体外和体内实验,结果表明Ce6-TPP-Phe-tyr不仅能够高效产生ROS,还可以深度穿透肿瘤组织,原位自组装成纤维状纳米胶束。相比目前通用的纳米粒子包裹Ce6策略,我们构建的体系可以实现Ce6在肿瘤细胞中的高摄取并靶向富集在线粒体部位,不会发生Ce6泄露问题,提高了ROS产率,极大地增强了光动力疗法的抗肿瘤效果。（2）合成了含有二硫键的双N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS酯）NHS-SS-NHS,然后通过NHS酯反应将白介素21（IL-21）蛋白与NHS-SS-NHS相结合,构建蛋白纳米颗粒。随后,利用蛋白纳米颗粒表面多余的NHS酯与anti-CD45蛋白上的氨基反应,将anti-CD45蛋白负载到蛋白纳米颗粒表面,得到anti-CD45蛋白修饰的纳米颗粒ILNPs。接着,通过糖代谢工程在NK细胞和人淋巴瘤细胞（Raji）表面分别标记上能够发生生物正交反应（Click反应）的叠氮基团（Ac4Man NAz/N3）和环张力炔烃基团（Ac4Man-BCN/BCN）,得到修饰后的N3-NK细胞和BCN-Raji细胞。随后,通过上述制备的纳米颗粒ILNPs表面的anti-CD45蛋白与N3-NK细胞发生抗原抗体反应,将ILNPs结合到N3-NK细胞表面,得到生物正交靶向的活细胞纳米载体N3-NK-NPs。利用N3-NK-NPs表面修饰的N3基团与淋巴瘤细胞表面修饰的BCN基团发生Click反应,实现NK细胞主动靶向识别肿瘤细胞,从而实现NK细胞在肿瘤组织部位的高效富集和深层浸润。在肿瘤细胞的刺激下,NK细胞表面还原性升高,从而实现NK细胞表面负载的ILNPs纳米颗粒中的二硫键还原响应性断裂,释放低剂量的IL-21细胞因子,既降低了全身系统毒性,又实现了IL-21持续有效地活化NK细胞的效果。同时。实验结果表明活细胞纳米载体N3-NK-NPs显著逆转了肿瘤免疫抑制微环境,产生了更强的抗肿瘤免疫反应。
其他文献
目的:膜蛋白是生命活动的主要承担者,是目前70%左右临床药物的作用靶点。但由于膜蛋白的两亲性,其结构与功能研究远滞后于可溶性蛋白。去垢剂是一种双亲性分子,可组装成胶束以保护膜蛋白在水溶液中不聚集,是研究膜蛋白的重要工具。制备溶解性和稳定性好的膜蛋白样品需要合适的去垢剂,然而现有的去垢剂种类还远远不能满足结构和功能不同的膜蛋白在不同生物物理研究中的应用。因此急需开发结构多样化的去垢剂。方法:在不同的
背景:胃癌是我国常见恶性肿瘤。由于血管生成不足和“Warburg”效应,胃癌组织处于葡萄糖剥夺和乳酸（lactic acid,LA）浸润状态。PARP1作为DNA修复酶,在氧化应激等条件下表达异常上调,使p ADPr合成增多,导致AIF在细胞核内聚集,最终诱发PARP1依赖性死亡。胃癌细胞在葡萄糖剥夺下是否发生PARP1依赖性死亡还未有报道。LA被认为是肿瘤细胞在葡萄糖剥夺下存活的关键支持者,其在
目的:课题组前期研究已经报道apelin-13/APJ系统促血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖。文献报道线粒体未折叠蛋白反应（mt UPR）和Lon protease-like 1（Lonp1）能够诱导细胞增殖。上调类泛素蛋白F adjacent transcript 10（FAT10）能够诱导mt UPR的发生和细胞增殖,且生物信息学预测FAT10和Lonp1具有相互关系。据此提出FAT10化修饰
肝纤维化是肝脏因修复多种慢性损伤而导致的结缔组织在肝脏实质内过度增多的病理性过程。肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSCs）的激活和异常扩增是肝纤维化的中心环节。抑制活化态HSC增殖和诱导其凋亡是治疗肝纤维化的重要手段。与胶原蛋白高亲和的PIGF-2123-144-Bi PPB-mim IFNγ融合蛋白是靶向活化态HSC并同时滞留纤维化肝组织的、IFNγ活性的抗纤维化重组
乳腺癌严重危害人类健康,据世卫组织国际癌症研究机构（IARC）2020年发布的数据显示,位居女性癌症首位的乳腺癌新发病例226万已超过肺癌的220万成为全球头号癌症。化疗是临床治疗乳腺癌最经典和常用的方法之一,但是化疗药物的脱靶效应,即在到达病灶部位前的提前释放,极大降低了药物对远处实体瘤的治疗效果,并进一步引发全身的毒副作用。随着纳米医学的发展,利用纳米技术与化疗药物相结合,设计智能纳米药物载体
目的:阿霉素广泛用于癌症治疗,但其心脏毒性限制了临床应用,阿霉素诱导心脏毒性机制尚未清楚,铁死亡是阿霉素心脏毒性中受调节的细胞死亡的主要形式。甘草苷（Liquiritin,LIQ）是甘草根的主要成分,具有抗炎、抗氧化、抗凋亡、抗菌和抗癌作用,但其是否对阿霉素诱导心脏毒性有缓解作用尚未清楚,本研究通过建立阿霉素（Doxorubicin,DOX）心脏毒性小鼠和细胞模型,给予不同浓度甘草苷干预,探讨甘草
慢性粒细胞白血病（CML）是一种恶性的骨髓增殖性疾病,可见于任何年龄,其发病率男性略高于女性。主要表现为未成熟的白细胞异常增多并在骨髓处聚集,随之而来的是抑制骨髓的正常造血功能、导致骨髓衰竭,进一步在全身各处扩散,从而出现严重的血液学症状。若病情未经控制发展到急变期,通常患者会在一年内健康状况迅速恶化导致死亡,因此对CML的及早治疗显得尤为重要。目前已知的有效治疗CML的首选药物为BCR-ABL抑
目的:肺癌是全球癌症死亡的最主要原因。研究发现表皮生长因子受体（EGFR）在80%以上的非小细胞肺癌（NSCLC）中高表达。因此,针对这一靶点的分子靶向治疗在NSCLC的治疗中取得了显著的疗效,尤其是有19外显子缺失突变和21外显子点突变（L858R）的患者。但最终多数患者会对EGFR酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIs）产生耐药。目前,已经发现了多种EGFR敏感突变的NSCLC对EGFR-TKI
目前,化疗药物基因纳米共递送体系面临缺乏肿瘤靶向性、血液循环时间短、细胞摄取差和转染效率低等问题。迫切需要开发安全高效的主动靶向纳米共递送系统。靶向配体能赋予纳米系统良好的肿瘤靶向性,开发基于靶向配体的纳米共递送体系已成为解决问题的重要手段。乳糖酸作为一种主动靶向肝癌细胞的天然特异性配体,被广泛用于构建肝癌靶向的纳米载体,而且作为一种常用的稳定剂,能提高纳米体系的稳定性。因此有望通过探索乳糖酸的接
目的:磁共振成像在细胞追踪、血管生成、细胞凋亡等领域有着广泛的应用。传统的氢-1磁共振成像（~1H MRI）由于存在强背景干扰,不适用于体内靶标的追踪与量化。无背景干扰和可定量的氟-19磁共振成像(19F Magnetic Resonance Imaging,19F MRI)被视为传统~1H MRI的一个有价值的补充。常用的基于全氟化合物的19F MRI显影剂因存在信号裂分、密度高、对功能分子溶解