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第一部分ABO不相容活体肾移植临床预后分析----回顾性队列研究背景与目的ABO不相容活体肾移植(ABO-incompatible living kidney transplantation,ABO-ILKT)经历数十年的发展,目前总体预后与ABO相容活体肾移植(ABO-compatible living kidney transplantation,ABO-CLKT)相当,在各国开展广泛。然而,由于围手术期治疗方案和地域人群的不同,各中心的预后情况存在差异。为了更好地了解本土人群ABO-ILKT的预后情况,并探究C4d沉积是否为其预后的危险因素,我们开展了本项研究。方法本研究对2017年3月至2019年3月之间于浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心行活体供肾移植术的患者进行预后随访,观察终点为2020年2月28日。研究一共纳入39例ABO-ILKT和340例ABO-CLKT患者,ABO-ILKT根据术后1年移植肾活检C4d沉积与否又分为C4d+(n=22)和C4d-(n=9)两个亚组,对其进行人肾存活率、排斥反应和BK相关肾病,以及17项随访化验指标的比较结果ABO-ILKT患者在降低血胆固醇方面有获益,然而移植肾功能、抗感染能力、血红蛋白和凝血功能方面却差于ABO-CLKT患者。ABO-ILKT患者术后1年排斥反应发生率,包括抗体介导的排斥反应(antibody-mediated rejection,AMR)(p=0.009)和T细胞介导的排斥反应(T cell mediated rejection,TCMR)(p=0.004),以及临界改变(p<0.001)的发生率均高于ABOc患者,死亡纳入的移植肾丢失率(p=0.001)也显著高于ABOc患者,而两组的1年人存活率无统计学差异。C4d沉积在ABO-ILKT患者中与BK相关肾病(BK-associated nephropathy,BKAN)、急性排斥反应、死亡纳入的移植肾存活率,以及患者生存率无明确关联。然而C4d+组术后1年的尿蛋白阳性率较C4d-组有显著增加(p=0.008)。结论ABO-ILKT在临床预后方面差于ABO-CLKT患者,但总体预后良好。C4d沉积并不是ABO-ILKT预后的危险因素。第二部分ABO不相容活体肾移植术后AMR的预测因子探索背景与目的AMR是ABO-ILKT术后最常见的并发症之一,可影响移植肾功能及人肾存活率。然而其诊断目前依赖于移植肾活检,利用检测外周血实现早期AMR的无创性预测和诊断具有良好的发展前景。本研究通过检测与肾损伤相关的17种细胞因子判断其在ABO-ILKT患者AMR中的诊断价值,并进一步了解C4d沉积与AMR发生发展的内在联系。方法本研究纳入了2017年3月至2019年3月于浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心行ABO-ILKT术后未发生AMR的患者(移植肾活检C4d+19例,C4d-9例),2010-2019年术后移植肾活检提示AMR的患者(n=18)及预后良好的ABO-CLKT患者(n=10),检测其移植肾活检入院时外周血中包括CCL2、TNF-alpha在内的17种细胞因子水平进行亚组比较。结果ABO-ILKT患者中C4d+组和C4d-组未见显著差异;ABOi-C4d+non AMR组的CCL2水平显著高于ABOc-AMR组(p=0.0074);ABOi-C4d+non AMR组的TNF-alpha水平显著高于对照组(p=0.0009);ABOc-AMR组TNF-alpha(p=0.0016)和CXCL10(p=0.0311)水平显著高于对照组;ABOi-C4d-non AMR组的TNF-alpha水平显著高于对照组(p=0.0110)。结论TNF-alpha仅对ABO-CLKT患者AMR有一定的诊断效用。ABO-ILKT术后未发生AMR的患者体内有较强的炎症因子趋化发生,但其损伤程度在下游受到了限制。第三部分ABO不相容活体肾移植患者的免疫状态评估背景与目的AMR是ABO-ILKT预后的独立危险因素,然而目前缺乏有效的无创性诊断手段,本研究通过建立B细胞抗原受体(BCR)的免疫组库,深入了解ABO-ILKT患者术后的免疫状态,以期实现AMR的早期预防和诊断。方法本研究纳入了2017年3月至2019年3月于浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心行ABO-ILKT术后未发生AMR的患者(移植肾活检C4d+17例,C4d-9例),2010-2019年ABO-CLKT术后移植肾活检提示AMR的患者10例,对移植肾活检入院时的外周血单核细胞进行BCR高通量测序。结果ABO-ILKT患者中C4d-组的克隆扩增低于其余两组。ABOc-AMR组与ABOi-C4d-组的克隆种类数相似度为93.2%。ABO相容(ABO compatible,ABOc)-AMR组与ABO不相容(ABO incompatible,ABOi)-C4d+non AMR组相比,克隆扩增最显著的特异性IGHV基因片段为IGHV3-43、IGHV4-4、IGHV1-46、IGHV1-2、IGHV3-53;ABOi-C4d+non AMR组与ABOi-C4d-组相比,克隆扩增最显著的特异性IGHV基因片段为IGHV1-24、IGHV3-48、IGHV2-26、IGHV3-20、IGHV3.66。结论BCR测序可以从克隆多样性、克隆扩增情况以及特异性克隆表达,反映出ABO-ILKT术后患者的免疫状态。