氨/硫化氢及三丁基氧化锡对卵母细胞体外成熟的危害及其机制

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研究表明,硫化氢(H2S)和氨(NH3)是两种主要的空气污染物,会对猪的健康造成损害,而这些化合物对猪卵母细胞成熟的毒性作用以及机制还不清楚。为了阐明该机制,我们用硫化钠( Na2S )和氯化铵( NH4Cl )体外处理猪卵丘卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complexes, COCs),检测卵母细胞成熟过程中的一系列重要事件来评测卵母细胞的质量。在我们的研究中,Na2S和/或NH4Cl处理使第一极体排出率显著降低,肌动蛋白微丝被严重破坏。我们还发现Na2S会导致卵母细胞中的ROS水平明显增加。同时,Na2S和/或NH4Cl处理使早期凋亡率显著增加,自噬蛋白LC3B表达水平也显著增高。此外,卵丘细胞内也产生较高水平的 ROS,同时出现早期凋亡,这会进一步影响卵母细胞的成熟。总之,我们的数据表明,暴露于Na2S和/或NH4Cl会降低猪卵母细胞体外成熟,这是由于卵母细胞内肌动蛋白受损,ROS 升高,早期凋亡和自噬引起的,同时,卵丘细胞中ROS的升高以及早期凋亡的出现,在一定程度上促进了Na2S和/或NH4Cl的毒性作用。  三丁基氧化锡(Tributyltin-oxide,TBTO)作为三丁基锡化合物之一,被广泛用作海洋防污成分、防腐剂和杀菌剂。研究表明,TBTO会对动物产生毒性,尤其是免疫系统。然而,TBTO对卵母细胞成熟和发育潜能的毒性和潜在机制尚不清楚。为了探究该机制,我们在小鼠卵母细胞体外成熟培养液中添加了不同浓度的TBTO,结果显示TBTO处理显著降低第一极体的排出率,纺锤体形态异常率显著增加,染色体不规则排列的比率明显升高。此外,TBTO 显著提高了卵母细胞内 ROS 水平,加剧了早期细胞凋亡。我们还检测到较高比例的线粒体非均质分布和线粒体功能障碍,同时发现TBTO显著提高卵母细胞非整倍性的比率,这些影响扰乱了体外受精(IVF)和早期胚胎发育。总之,我们的结果表明TBTO暴露会干扰小鼠卵母细胞体外成熟,这是由纺锤体组装遭到破坏, ROS 升高以及早期凋亡所造成的。同时,TBTO 暴露还会损害 IVF 和早期胚胎发育,这与线粒体功能障碍以及染色体非整倍性相关。
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