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目的: 获取MCAO气虚血瘀证大鼠子二代,与正常同龄SD大鼠相比,研究其脑缺血耐受性有无差异,是否存在血脂紊乱及APOE基因表达的改变,探讨其缺血性脑卒中发病风险是否高于正常同龄SD大鼠。 方法: 第一部分:在获取的MCAO气虚血瘀证子二代大鼠中随机选取10只进行证候造模(模型组),与同样进行证候造模的10只正常同龄SD大鼠(对照组)及无干预因素参与的10只正常同龄SD大鼠(空白组)比较,观察其气虚证辨证评分、血瘀证辨证评分及相关行为学评分(旷场分析、攀网试验)。 第二部分:随机选取前MCAO气虚血瘀证子二代大鼠20只及正常同龄SD大鼠20只,分为正常对照组、子二代组、药物干预组、假手术组4组,采用全脑一局灶脑缺血耐受的造模方法,观察其神经功能缺损评分,处死大鼠后,灌注固定脑组织,HE染色观察其缺血脑组织病理改变;免疫组化检测其缺血脑组织BDNF、Bax、Bcl-2、ERK的表达。 第三部分:随机选取MCAO气虚血瘀证子二代大鼠10只(子二代组)及正常同龄SD大鼠10只(空白对照组),观察其血脂(TG、TC、HDL-C、LDL-C)及血浆APOE基因表达水平是否存在差异,并比较两组大鼠的血脂促动脉硬化指数及血脂综合指数。 结果: 第一部分:证候学评分:在证候造模因素干预前,模型组大鼠气虚证评分虽未达到8分,但明显高于对照组及空白组(P<0.05),而血瘀证的评分,在证候造模因素干预前三组大鼠无明显差异(P>0.05);造模因素干预28天后,模型组10只大鼠中,有8只大鼠同时满足气虚证评分≥8分及血瘀证评分≥8分;而对照组10只大鼠中,仅有6只同时满足气虚证评分≥8分及血瘀证评分≥8分;且模型组气虚证评分与血瘀证评分均明显高于对照组。行为学评分:在证候造模因素干预前,模型组大鼠的中央格起始停留时间评分高于对照组和空白组,而模型组大鼠垂直活动次数评分低于对照组和空白组(P<0.05);证候造模因素干预28天后,中央格起始停留时间评分,模型组明显高于对照组和空白组,且对照组也高于空白组,而大鼠垂直活动次数、跨格次数、攀网实验评分,模型组明显低于对照组和空白组,且对照组也低于空白组(P<0.05)。 第二部分:神经功能缺损评分:子二代组大鼠的神经功能损缺评分高于正常对照组(P﹤O.05),而与假手术组相比无明显差异(P﹥O.05);同时药物干预组的神经功能损缺评分明显低于子二代组及假手术组(P﹤O.01)。BDNF表达:正常对照组、药物干预组的BDNF蛋白表达均高于假手术组及子二代组(P﹤O.05);而子二代组的BDNF蛋白表达与假手术组相比,差异无统计学意义(P﹥O.05)。并且药物干预组的BDNF蛋白表达明显高于子二代组,差异有统计学意义(P﹤O.05)。Bax表达:正常对照组、药物干预组的 Bax蛋白表达均低于假手术组及子二代组(P﹤O.05);而子二代组的Bax蛋白表达与假手术组相比,差异无统计学意义(P﹥O.05)。并且药物干预组的Bax蛋白表达明显低子二代组(P﹤O.05),而与正常对照组相比无明显差异(P﹥O.05)。Bcl-2表达:正常对照组、药物干预组的Bcl-2蛋白表达均高于假手术组子及二代组(P﹤O.05);而子二代组的Bcl-2蛋白表达与假手术组相比,差异无统计学意义(P﹥O.05)。并且药物干预组的Bcl-2蛋白表达明显高于子二代组(P﹤O.05)。ERK表达:正常对照组、药物干预组的 ERK蛋白表达均高于假手术组及子二代组(P﹤O.05);而子二代组的ERK蛋白表达与假手术组相比,差异无统计学意义(P﹥O.05)。并且药物干预组的ERK蛋白表达明显高于子二代组(P﹤O.05)。 第三部分:血脂:子二代组大鼠的TC、LDL-C水平与空白对照组比较,无统计学差异(P>0.05);而子二代组大鼠的 TG水平明显高于空白对照组,(P<0.01),并且其HDL-C水平低于空白对照组(P<0.05)。子二代组大鼠的AIP及LCI均明显高于空白对照组(P<0.01)。血浆APOEmRNA表达:子二代组大鼠血浆中APOE基因表达的相对含量高于空白对照组(P<0.05)。 结论: 1.MCAO气虚血瘀证大鼠子二代与正常同龄SD大鼠相比,存在一定程度的气虚倾向,在证候造模因素的干预下,能更为容易的形成更加明显的气虚血瘀证候; 2.MCAO气虚血瘀证大鼠子二代与正常同龄SD大鼠相比,对脑缺血的耐受及修复能力降低,在缺血因素的干预下更容易形成更严重的缺血性脑损害,其发生缺血性脑卒中的风险高于正常同龄SD大鼠。 3.MCAO气虚血瘀证子二代大鼠的脑缺血耐受性降低可能与其ERK信号转导通路及其下游靶基因和蛋白(细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax,BDNF)的表达异常有关。 4.使用益气活血的脑心通胶囊可以改善MCAO气虚血瘀证子二代大鼠的脑缺血耐受性,促进其对缺血性脑损伤的修复能力。 5.MCAO气虚血瘀证大鼠子二代与正常同龄SD大鼠相比,存在明确的血脂代谢紊乱。 6.MCAO气虚血瘀证大鼠子二代与正常同龄SD大鼠相比,血浆APOEmRNA表达增高。