目的研究慢传输型便秘(STC)发生与Cajal间质细胞自噬之间的关系方法清洁级健康雄性SD大鼠60只,体重200~250g之间,随机分2组,对照组与实验组每组各30只大鼠。实验组大鼠按照50 mg/kg盐酸小檗碱剂量以10 ml/kg的标准对各组大鼠进行连续灌胃14天,对照组大鼠以同实验组等量的生理盐水灌胃14天。14天后各组大鼠禁食16h然后使用墨汁活性炭悬液灌胃处理大鼠,通过检测墨汁灌胃后6h大鼠排便粒数,首次排黑便时间以及粪便含水量确认STC造模是否成功。鉴定造模成功后,分别通过Western Blot和免疫组化法检测两组大鼠肠内酪氨酸蛋白激酶受体(c-Kit蛋白)的表达水平以反映结肠肠道内Cajal间质细胞的变化情况。然后使用透射电镜TEM法检测实验组大鼠Cajal间质细胞内细胞自噬泡的水平并使用Western Blot法检测结肠组织自噬相关标志蛋白Beclin-1,LC3的表达变化。最后使用流式细胞法和免疫荧光法相结合来检测大鼠肠道肌群中ICCs细胞内Ca2+离子的浓度变化。试验中采用统计软件SPSS16.0对实验数据进行分析,组间数据两两比较采用LSD-t检验。以P<0.05为结果具有统计学差异。结果1灌胃后实验组大鼠体重与对照组比较,差异无统计学意义。通过墨汁灌胃后6h大鼠排便粒数,首次排便时间以及粪便含水量的检测结果显示,50 mg/kg盐酸小檗碱灌胃14天后,实验组大鼠的粪便粒数和粪便含水量均降低,两组数据间差异有统计学意义(P<0.05),同时,实验组大鼠的首次排黑便时间延后(P<0.05),表明大鼠肠道传输功能受阻,体现了慢传输型便秘的症状。结果显示使用盐酸小檗碱造大鼠慢传输型便秘模型成功。2免疫组化法检测大鼠肠道组织结果表明,实验组大鼠肠道内Cajal间质细胞形态发生明显变化且细胞数量有所降低,与对照组相比数据间差异有统计学意义(P<0.05)。Western Blot法检测大鼠肠道内蛋白表达的结果表明,实验组与对照组相比,大鼠肠道内c-Kit蛋白表达明显减少。结果表明盐酸小檗碱引发Cajal间质细胞的变化可能是导致大鼠慢传输型便秘的原因。3透射电镜TEM检测大鼠Cajal间质细胞内自噬泡水平的结果表明,实验组大鼠肠道内Cajal间质细胞自噬泡形成,与对照组相比其差异具有统计学意义(P<0.05)。Western Blot法检测Cajal间质细胞内自噬标志蛋白的结果表明,Cajal间质细胞自噬蛋白Beclin-1,LC3表达均显著上调,表明大鼠慢传输型便秘的发生可能与Cajal间质细胞的过度自噬导致的自噬性死亡有关。4通过流式细胞法和免疫荧光法,以Ca2+荧光指示剂检测法检测ICCs中游离Ca2+离子的浓度变化的结果显示,慢传输型便秘大鼠模型中Cajal间质细胞细胞内游离Ca2+离子升高,Ca2+离子升高可能是导致Cajal间质细胞自噬性死亡的原因。结论1慢传输型便秘大鼠模型中大鼠肠道内Cajal间质细胞的形态萎缩并且数量减少。2慢传输型便秘大鼠模型肠道内Cajal间质细胞发生了明显的细胞自噬现象,这可能是引发Cajal间质细胞数量减少从而导致慢传输型便秘的成因之一。3慢传输型便秘大鼠模型中Cajal间质细胞细胞内游离Ca2+离子升高,Ca2+离子升高可能是导致Cajal间质细胞自噬性死亡的原因。