【摘 要】
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脂多糖(LPS)是革兰阴性菌(GNB)细胞壁的主要成份,是GNB所致脓毒症多种病理生理反应的第一触发因子。其引起的脓毒症和脓毒性休克是严重危及生命的全身性炎性反应综合征,致死
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脂多糖(LPS)是革兰阴性菌(GNB)细胞壁的主要成份,是GNB所致脓毒症多种病理生理反应的第一触发因子。其引起的脓毒症和脓毒性休克是严重危及生命的全身性炎性反应综合征,致死率在儿童及成年人中分别达10～15%和40%左右。探讨脓毒症的新的有效防治途径无疑具有重要意义。近年研究发现,高迁移率族蛋白1(HMGB1)作为脓毒症潜在的晚期炎症介质参与了内毒素的致病过程,是脓毒症致死效应的重要炎症介质,对HMGB1干预可有效阻止脓毒症。HMGB1结构域B盒在炎症过程中的生物学功能与全长HMGB1相似,在HMGB1的致炎作用中发挥巨大作用。HMGB1结构域A盒具有类似HMGB1抗体的作用,可抑制细胞外HMGB1的活性,减少TNF-α等炎症介质的释放,控制脓毒症的发生发展。LPS结合蛋白(LBP)作为LPS的转运蛋白,控制着LPS诱导的单核/巨噬细胞炎性反应。LBP结构域LBPK95A可阻断LPS与LBP的结合,抑制LPS的细胞毒作用。如果将HMGB1 A盒和LBPK95A两者结合起来,从脓毒症的级联反应的早期和晚期进行干预,有可能为脓毒症的防治提供新的有效途径。为此本课题进行了以下主要研究:鼠高迁移率族蛋白1结构域A盒、B盒编码序列的克隆和原核表达及生物学活性鉴定;HMGB1A盒与LBPK95A融合基因的表达及纯化;A-LBP融合蛋白生物学功能的初步研究。 一、HMGB1 A盒及B盒编码序列的克隆表达、产物纯化和活性鉴定
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