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研究背景中医认为癌肿的形成和发展,和癌细胞的不能正常死亡有关。现代中医发现.按照调整正邪关系的方法叮以诱导癌细胞凋亡。恶性肿瘤常表现为某些癌基因的过度表达,和某些抑癌基因的表达受抑。针对这些情况、西医药专家正在研究和开展所谓“基因治疗”。现代中医发现,根据正邪关系失衡而采用的治疗,对癌基因和抑癌基因的表达有调控作用。膀胱肿瘤是泌尿外科目前最常见的恶性肿瘤之一,现在临床上治疗方法主要有化疗及放疗和手术治疗。但是这些方法不仅价格昂贵,而且膀胱肿瘤严重威胁着人类的健康和生命。近年来传统中医药在抗肿瘤方面的作用得到了深入的研究,越来越多的中药被应用在肿瘤的治疗当中。虽然有研究表明,GA能抑制包括乳腺癌、肝癌、血液系肿瘤、以及乳腺癌在内的多种肿瘤细胞的生长,但是目前对于藤黄酸在泌尿系肿瘤作用的报道尚少。研究目的体外培养人膀胱癌细胞株BIU-87,并通过MTT法、免疫组化法、流式细胞仪检检测分析藤黄酸对BIU-87人膀胱肿瘤细胞增殖的抑制作用及诱导肿瘤细胞凋亡的作用。研究方法(1)体外培养人膀胱癌细胞株BIU-87。(2)将不同浓度藤黄酸加入处于对数生长期的人膀胱癌BIU-87细胞共培养,使用咪唑兰(MTT)法检测藤黄酸对人膀胱癌细胞增殖的抑制作用。(3)免疫组织化学S-P法检测瘤组织Caspase-3蛋白的表达(4)将不同浓度的藤黄酸加入处于对数生长期的人膀胱癌BIU-87细胞共培养,使用流式细胞仪检测分析藤黄酸诱导人膀胱癌细胞的凋亡作用和细胞周期变化。研究结果(1)MTr实验发现,1.0μmol/L组、2.0μmol/L组、3.0μmol/L组藤黄酸对BIU-87膀胱癌细胞作用24h或48h后,各实验组对膀胱癌细胞增殖的抑制作用均明显高于对照组,各组间比较P<0.05。(2)运用免疫组织化学法检测Caspase-3的表达:测出对照组、藤黄酸1.0μmol/L组、2.0μmol/L组、3.0μmol/L组,结果用免疫组化评分(HIS)分别为:2.13±1.27、428±1.86、5.03±0.78、6.47±1.31。各组与对照组相比差异均有统计学意义(p<0.05)。(3)流式细胞术结果显示:各浓度藤黄酸组作用膀胱癌细胞24h或48h后,其膀胱癌细胞凋亡率均高于对照组;藤黄酸作用48h后细胞凋亡百分率高于24h,且随浓度增加凋亡率递增。细胞周期Go/G1期细胞逐渐减少,G2/M期细胞逐渐增多,s期细胞变化不明显。研究结论(1)藤黄酸可抑制.BIU-87人膀胱癌细胞增殖,其效应作用呈剂量、时间依赖性。(2)藤黄酸可通过增加Caspase-3蛋白的表达。(3)藤黄酸可抑制BIU-87人膀胱癌细胞凋亡,其效应作用呈剂量、时间依赖性。