蒙古绵羊Ghrelin cDNA的克隆和原核表达

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:songlyan182320697
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
Ghrelin是Kojima等1999年发现的生长激素促分泌素受体(GHSR)的第一个内源性配体,Ghrelin除调节生长激素分泌外,还有增加食欲,调节能量平衡,促进胃酸分泌等作用。根据Genbank中检索羊prepro Ghrelin mRNA序列,设计了蒙古绵羊Ghrelin原核表达引物。通过RT-PCR技术扩增Ghrelin cDNA,将其与pMD-19T Vector连接,转入大肠杆菌经鉴定正确后,回收目的片段与原核表达载体pET-32a(+)相连接,并转化BL21(DE3)大肠杆菌。经IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果显示克隆的蒙古绵羊Ghrelin cDNA序列与已发表序列有两个碱基的差异,该碱基的变化并不影响氨基酸序列,目的蛋白主要以可溶性形式存在,Western-blot初步证实了所获的融合蛋白是特异的,结果表明成功构建了蒙古绵羊Ghrelin基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达,为进一步研究蒙古绵羊Ghrelin基因的功能提供参考。?
其他文献
摘 要: 作者以摸索网络课上机操作考试的适当方式为的目的,采用实验的方法,在实际考试中检验了多套上机操作考试方式,从技术上验证了各种操作考试方式的优劣,并不断根据实验结果改进操作考试方式。最后,根据教育考试理论的检验和实施中得到结论:在小规模的《计算机网络》考核中使用虚拟计算机进行操作考核的方式是可行的,该方式很好地体现了考试的督导、发展、导向诸功能。  关键词: 《计算机网络》课程 上机操作考试
摘 要: 为了克服传统教学方式的各种弊端,作者以建构主义为指导对微生物学课程的教学模式进行了改革,包括以建构主义为指导的专题讨论教学法与多媒体辅助教学。在考试形式和实验教学方面,则采用了多元化考核方式和增添了设计性实验。作者通过以上改革,更好地适应了新形势下微生物学教学的需求。  关键词: 微生物学 建构主义 教学改革    进入新世纪以来,国外的微生物学教学内容和模式发生了较大的转变。在授课内容
纤溶酶原(Plg)能与金黄色葡萄球菌表面的纤溶酶原受体通过其赖氨酸结合位点(LBS)结合,并在宿主或细菌的纤溶酶原激活剂作用下激活为有水解蛋白活性的纤溶酶,从而使金黄色葡萄
摘 要: 目前计算机类专业就业形势不容乐观,企业为了降低成本要求招聘的人员不用培训就可上岗,而高校培养的计算机类学生没有完整项目开发的经历找不到合适的工作。在此情况下,作者对JAVA课程提出并实践了基于工作过程的项目教学模式改革:通过对完整项目的实施过程来设计教学过程,理论以项目够用为原则。本文探讨了JAVA课程基于工作过程的项目教学改革和实践,它包括实施的必要性,实施的可能性,教学思路论证,教学
奶牛产后子宫感染是奶牛产后期常见的情况,本研究通过分析影响产后子宫恢复的因素;对产后子宫恢复进行量化跟踪,并应用药物促进子宫恢复,为奶牛产后期子宫恢复提供量化标准与保健
摘 要: 新课程改革的最大特点是要求以学生的发展为本,把学生身心的发展和潜能的开发作为核心。这对于语文教师而言,既是一种机遇,更是一种挑战。语文教师必须努力学习新课标,努力进行探索,从根本上转变陈旧的教学思想观念,选择恰当的教学方式。  关键词: 新课改 语文教师 转变    一、新课改下带来的教师的观念转变及角色转换  语文课程标准指出:“语文教学应在师生平等对话的过程中进行”,即教学中建立一种
随着教育改革的不断深入,新课程改革已全面展开,数学活动课是数学新课程的一项重要组成部分,教学时通过活动课对学生所学知识进行延伸和拓宽,具有巩固、弥补、深化、提高的作用。活动课以培养学生数学兴趣为前提,以学生原有知识为基础,以发展学生思维为中心,以提高学生数学能力为目的,注重全面发展学生的个性特长,培养学生的创新能力和实践能力,所以在教学过程中数学活动课的实施至关重要,我认为活动课应充分体现“活”与
课程改革是一个全新的事物,是对旧式教学的挑战,它与孩子一生的命运息息相关。美国教育家杜威先生说:“给孩子一个什么样的教育,就意味着给孩子一个什么样的生活。”作为中学语文教师,我常常思索着这样一个问题:到底应该给学生一个什么样的语文课堂?根据自己多年的教学经验,我对新课改下的语文教学进行了探索和研究。  一、为了使阅读课更有层次性,可以把阅读课分为三个类型。  (一)读书指导课  给学生讲清阅读的重
自教育部2002年颁布了《基础教育课程改革纲要》以来,各地的课程改革热火朝天,教学教研活动如火如荼,音乐教学出现了“百花齐放”的新局面。然而,作为改革大潮中的一员,我发现在这欣喜的背后,仍存在着一些令人深思的问题。  一、旧的都要抛弃,越新越好  谈起音乐课改的话题,我听到过这样的观点:我们要上好现在的音乐课,就要抛弃所有传统的教学观念、教学方法,越新越好。对于以上看法,我不禁有些忧虑:新课程改革