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本文分为两大部分:第一部分为文献综述,第二部分为实验部分。
本文的第一部分是对哺乳动物中的Kelch蛋白进行了综述。在不同生物体,如病毒、植物、真菌和哺乳动物中,几百种含Kelch构象的蛋白质已经被鉴定出来了,但大部分此类蛋白的功能未知。而在哺乳动物中,已经有接近41种Kelch蛋白被报道出来了(至09年10月份)。这些蛋白在体内参与了很多重要的生理过程。根据Kelch蛋白的域结构不同,我们把这些哺乳动物中的Kelch蛋白分成了三类,并对其已知的功能大致划分为五类:介导蛋白一蛋白的相互作用、参与蛋白质降解、信号传导、胞外功能及其它等。另外我们还认为Keap1的Kelch结构域的晶体结构应该是研究哺乳动物Kelch蛋白的一个很好的参考模型。
第二部分是关于一种新的含Kelch结构域的蛋白磷酸酶BSL4的初步研究。首先在基因水平上,我们筛选了双插入的隐性突变体,并观察到突变体植株生长的异常现象,暗示了基因的可能功能。而在蛋白质水平上,我们从BSL4全长及剪切体的表达载体的构建、表达和纯化展开,并对BSL4的活性,激活剂、抑制剂进行了探索。为方便研究,我们还自制了BSL4的小鼠多克隆抗体。