草菇中β-木糖苷酶的分离纯化及酶学性质研究

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该论文主要对草姑所产生的半纤维素酶系统中的β-木糖苷酶(1,4-xylosidase,EC3.2.1.37)的诱导产生、提取纯化、酶学性质进行初步阐述.木聚糖和天然类半纤维素—稻草都是木糖苷酶产生的优良诱导因子.草菇在25L发酵罐中以稻草粉为基质进行生长,所产生的β-木糖苷酶经硫酸铵沉淀、苯基-琼脂糖疏水柱层、DEAE-Sephacel阴离子柱层析、TOSOHASS-HW-5S分子筛过滤分离等提纯步骤,达到了电泳纯,提纯倍数为241倍,收率为14.5﹪.该酶反应的最适pH为6.41-6.76,最适反应温度为55℃;在pH5.78-7.68之间酶活力稳定,52℃的半衰期(t<,1/2>)为1h.由凝胶过滤和SDS-PAGE测得的分子质量分别为282.5kD<,a>.在所测定的底物中,β-木糖苷酶仅对对硝基苯酚-β-D-木糖苷有专一性水解作用,其动力学参数K<,m>值为2.4mmol/L,V<,max>为42μmol/min·mg.该酶催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷水解将产物β-木糖反转成α-木糖.
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