【摘 要】
：
目的:探讨形觉剥夺近视豚鼠和正常对照豚鼠的视网膜色素上皮（retina pigment epithelium,RPE）内在视黄醇脱氢酶 5（retinol dehydrogenase 5,RDH5）基因转录水平和蛋白水平的差异。方法:30只3周龄的三色豚鼠被随机分为两组:实验组（n=15）,用乳胶面罩对豚鼠均行右眼遮盖（遮盖眼）,左眼不遮盖（自身对照眼）;对照组（n=15）,双眼不做任何干预。分别
论文部分内容阅读
目的:探讨形觉剥夺近视豚鼠和正常对照豚鼠的视网膜色素上皮（retina pigment epithelium,RPE）内在视黄醇脱氢酶 5（retinol dehydrogenase 5,RDH5）基因转录水平和蛋白水平的差异。方法:30只3周龄的三色豚鼠被随机分为两组:实验组（n=15）,用乳胶面罩对豚鼠均行右眼遮盖（遮盖眼）,左眼不遮盖（自身对照眼）;对照组（n=15）,双眼不做任何干预。分别于遮盖前、遮盖1周、遮盖2周、遮盖3周、遮盖4周检查屈光度和眼轴长度,并在最后一次检测后取眼球。采用免疫荧光法和免疫蛋白印迹法检测不同组（遮盖眼、自身对照眼、空白对照组）的RDH5蛋白表达位置和蛋白含量,Real-Time PCR法检测不同组的RDH5 mRNA的表达变化。结果:遮盖前和遮盖第4周,实验组的屈光度和眼轴均有明显的统计学差异（P＜0.001）,正常对照组遮盖前和遮盖第四周的屈光度和眼轴均无统计学意义（P=0.60、P=0.21）。形觉剥夺4周后,免疫荧光结果显示,相比于正常对照眼和自身对照眼,遮盖眼RPE层内RDH5标记的荧光明显减弱;免疫蛋白印迹法结果显示遮盖眼的RDH5蛋白水平明显下降（P=0.02）;RT-PCR结果显示遮盖眼RDH5 mRNA水平明显下调（P=0.0119）。结论:形觉剥夺型豚鼠近视眼的RPE细胞内RDH5基因的转录和蛋白水平的表达均下调,提示视网膜色素上皮RDH5可能在形觉剥夺型豚鼠近视眼的发生发展中发挥一定的作用。目的:研究全反式视黄酸（all-trans retinoic acid,atRA）对 ARPE-19细胞内的视黄醇脱氢酶5（retinol dehydrogenase 5,RDH5）、转化生长因子-β2（transforming growth factor-β2,TGF-β2）和基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）mRNA 水平的影响;以及 RDH5 mRNA的表达敲低后对ARPE-19细胞分泌的TGF-β2和MMP-2的影响。方法:以不同浓度的atRA（0～20 μM）干预ARPE-19细胞24 h后,光学显微镜下观察细胞的形态,采用CCK-8法检测各组细胞的活力;流式细胞术检测各组细胞的增殖凋亡情况,RT-PCR法检测RDH5以及近视相关信号因子TGF-β2和MMP-2 mRNA的表达情况;敲低RDH5 mRNA表达48h后,RT-PCR法检测ARPE-19细胞内近视相关信号因子TGF-β2和MMP-2 mRNA的表达情况。结果:随着atRA浓度增加,各组RPE细胞的形态与对照组相比无明显的差异,细胞活力呈下降趋势,但与对照组相比均无统计学差异（P=0.08、P=0.14、P=0.16、P=0.23、P=0.23）;流式细胞术检测结果显示atRA可以明显抑制RPE细胞增殖,促进其凋亡,并呈剂量依赖性,当atRA浓度超过5 μM,与对照组比均有统计学意义（P=0.027、P=0.0031）。RT-PCR结果表明atRA可以明显抑制RDH5 mRNA的表达水平（P=0.0006）,但可以明显促进TGF-β2和MMP-2 mRNA的表达（P=0.419、P＜0.05）;RT-PCR 结果显示当 RDH5 mRNA 敲低 48 h 后,TGF-β2 和 MMP-2 mRNA 的表达明显上调（P＜0.0001）。结论:atRA介导的ARPE-19细胞内近视相关信号因子MMP-2和TGF-β2转录水平的上调可被RDH5抑制,敲低RDH5基因可以使ARPE-19细胞分泌的近视相关信号因子MMP-2和TGF-β2的表达显著上调。提示RDH5基因可能参与介导atRA调控近视的发生发展过程。
其他文献
目的:以脂肪族聚酯为原料,制备同时含有诱导骨组织再生的功能层（GBRL）和抑制成纤维细胞增殖（AFL）作用的功能层的复合纤维膜,在体外验证其相应功能后再于大鼠下颌骨缺损模型中验证其骨修复作用,继而为该材料用于修复牙周炎引起的牙槽骨组织缺失提供依据。方法:应用静电纺丝技术制备了四种（M1、M2、M3和M4）功能化（GBRL和AFL）可吸收复合纤维膜,使用扫描电镜观察其表面结构和不同时间的降解状况。体
目的:探讨肾胺酶在心房颤动（atrial fibrillation,AF）的发生及发展中的作用。方法:在川北医学院附属医院心内科住院患者中,选取经心电图确诊为房颤的患者104名,非房颤患者104名,收集受试者的一般资料。采取受试者静脉血于EDTA抗凝管中,在室温下使用离心机于3000转/分转速下离心10分钟,使用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血浆肾胺酶、总儿茶酚胺浓度。结果:AF组肾胺酶浓度明显
目的:运用网状Meta分析的方法评价在冠脉药物洗脱支架术后双联抗血小板方案的疗效和安全性。方法:计算机检索 PubMed、The Cochrane Library、EMbase 和 Web of Science数据库,搜集有关冠脉药物洗脱支架术后不同双联抗血小板方案比较的随机对照试验（RCT）,检索时限均从建库到2020年12月31日。由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,
目的:探讨蒜氨酸对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）所建立损伤模型的保护作用,以及研究这种保护机制所涉及的相关靶点和信号通路。方法:使用MTT试剂盒检测蒜氨酸在不同浓度对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增值活力的影响。建立HUVEC损伤模型:80μg/mLox-LDL诱导HUVEC 24h,借助油红O染色观察细胞损伤情况;采用MTT试剂盒检测不同浓度蒜氨酸对HUVE
研究背景:膀胱癌（Bladder Cancer,BC）是一种常见的泌尿系统恶性肿瘤,其患病率逐年上升,并且呈现出年轻化的趋势。膀胱癌主要分为两种类型:非肌层浸润性膀胱癌（non-muscle-invasive bladder cancer,NMIBC）和肌层浸润性膀胱癌（muscle-invasive bladder cancer,MIBC）,两者占比分别约为70%～80%和20%～30%。在临床
目的:研究红景天苷对脂氧合酶15B（15-lipoxygenase type B,15-LOX-2）基因缺乏引起巨噬细胞泡沫化的调节作用及其作用机制。方法:1.使用Ana-1小鼠巨噬细胞构建15-LOX-2基因缺乏表达的稳定细胞系。shRNA 沉默 Ana-1 的 15-LOX-2 基因,Ana-1-sh15-LOX-2 细胞分为 shRen（对照）、sh15-LOX-2.1252 和sh15-L
目的:探讨非ST段抬高型心肌梗死患者（Non-ST-segment elevation myocardial infarction,NSTEMI）血浆超敏肌钙蛋白 T（High-sensitivity cardiac troponin,hs-cTn）、心脏型脂肪酸结合蛋白（Heart-Type Fatty Acid Binding Protein,H-FABP）、和肽素（Copeptin）、生长分
目的:探讨复方佛手口服液对行为绝望小鼠模型、利血平拮抗小鼠模型和CUMS抑郁大鼠模型是否具有抗抑郁作用,以及其作用机制研究。方法:1.50只SPF级雄性ICR小鼠被随机分为:正常对照组（BC）、氟西汀组（FC）、复方佛手口服液低（CB-L）、中（CB-M）、高（CB-H）剂量组,对由强迫游泳实验和悬尾实验制备的行为绝望小鼠模型进行行为学检测观察其静止时间;2.60只SPF级雄性ICR小鼠被随机分为
目的:制备共载Melan-A（aa26-35*A27L）多肽类似物（P多肽）与达沙替尼的新型类脂囊泡疫苗,为抗多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）治疗提供新的潜在治疗方案。方法:（1）流式细胞术检测达沙替尼对树突状细胞（DCs）成熟相关表面标志物表达的影响,ELISA法分析达沙替尼对DCs分泌细胞因子的影响。（2）采用薄膜水合法联合探头超声制备共载P多肽与达沙替尼类脂囊泡疫苗并对
目的:检测SOX2、CtBP1、及E-ca在结直肠腺癌（Colorectal adenocarcinoma）、结直肠腺瘤（Colorectal adenoma）、结直肠组织（Colorectal tissue）中的表达,探讨三种蛋白表达的相关性,分析三者与CRC临床病理特征及预后之间的关系,为CRC患者的临床诊断、预后判断及个体化治疗提供新指标、新思路。方法:根据纳入标准和排除标准收集川北医学院附