高效液相色谱（HPLC）是现代制药工业中不可缺少的分析工具,贯穿于药物开发和生产的各个环节。色谱固定相作为HPLC分离系统的核心,具有多种类型,可以满足不同化合物的分离需求。氨基键合硅胶固定相由于填料表面的氨基基团的高极性和可质子化性质,广泛应用于极性或酸性化合物的分离。但是对非极性化合物的保留能力较弱,影响了其分离应用的范围。此外,氨基柱常面临化学性质不稳定和色谱柱使用寿命短的问题。在填料表面引入疏水官能团可以有效提高氨基柱的稳定性,但这往往会降低氨基的键合量,从而影响固定相对目标分析物的分离选择性。聚倍半硅氧烷（PSQ）作为一种有机-无机杂化材料,具有比无机硅胶更好的耐热性和更强的疏水性。近年来,PSQ微球的功能化已成为许多领域的研究热点。本课题组前期通过将甲基三甲氧基硅烷（MTMS）和巯丙基三甲氧基硅烷（MPTMS）进行共水解-缩聚反应,制备了具有高水热稳定性和低硅醇活性的巯基功能化PSQ（Mp-P）微球。然而,由于合成过程中对孔结构缺乏控制,微球的孔径随着MPTMS含量的增加而变小,微孔的形成影响了柱效,限制了其应用。针对上述问题,在前人研究工作的基础上,通过优化制备工艺制备了Mp-P介孔微球,并利用“巯-烯”点击反应制备了氨基衍生化色谱固定相。研究了MPTMS占比对氨基键合量的影响,结果表明在一定范围内增加MPTMS比例可以有效提高氨基的键合量。此外,该固定相具有典型的反相/阴离子交换混合模式保留行为,在高碱热条件下具有较高的化学稳定性,并对复方药物具有良好的分离效果。之后,利用“巯-烯”点击反应在Mp-P填料表面键合酯基,通过酯的氨解反应制备了胺基衍生固定相,进一步提高了填料表面的氨基键合量。最后,通过氨解反应制备了多胺衍生固定相,并通过系统的色谱评价探究了多氨基作用位点的保留机理。结果表明,仲胺位点的增加使得固定相具有典型的亲水/阴离子交换混合模式保留行为,对含有极性离子型等多组份的复方药物表现出较高的分离选择性。