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研究背景海拔在3000米以上的地区,称为高原地区,其特点为气压低,氧分压也相应降低,易导致人体缺氧。高原低氧可导致一系列机体功能的异常,人体如不能适应这种环境,将引发高原病。其发病机理可能是高原缺氧导致肺、脑微循环的过度灌注,引起高原脑水肿和肺水肿。每年大约有几千万人去高原旅游、登山和从商,在高原地区的人类健康问题非常受关注。近年来,由于西部高原经济和军事的需要,进入高原地区的人群与日俱增,而高原缺氧反应不仅影响人们的工作能力和健康,甚至可引发高原病而危及生命。高原病分为急性高原病（肺水肿、脑水肿）和慢性高原病（血红蛋白增多症、高原性心脏病等）,通常认为高原脑水肿（HACE）是急性高原病（AMS）的继发病。高原脑水肿是一种复杂性疾病,受个体素质因素及环境因素影响,其发生存在个体及种族差异。高原脑水肿的发生机制至今未明,使其预测及防治等问题不能从根本上解决。人群中的遗传变异可能是引起高原脑水肿易感性的重要因素。国内外尚无从分子水平研究个体对HACE易感性的报道。本文应用以人群为基础的病例-对照研究方法,以肾上腺素受体a2A为候选基因分析遗传因素与高原脑水肿易感的相关性。研究方法本研究对象分为二部分,一部分为2002年-2005年青藏铁路建设者,他们出生和居住在平原,另一部分为青藏公路护路的藏族工人,为出生在青藏高原的世居人群。采用PCR-SSCP和直接序列分析方法,分析中国人肾上腺素受体a2A(a2A -AR)启动子区基因序列,寻找该基因中的多态性位点。利用PCR-RFLP和PCR-SSCP方法检测了该基因启动子区多态性位点在高原脑水肿患者和汉族、藏族健康工人中基因型和等位基因的分布,采用关联分析的方法,对比不同人群中多态性位点基因型分布情况,探讨基因多态性与高原脑水肿易感的相关性。研究结果肾上腺素a2A受体基因邻近启动子区2137bp区域经PCR-SSCP检测,并测序验证,结果只发现-1296G/C多态性位点,并未发现新的SNP。根据实验结果和文献报道,对a2A-AR基因启动子区的三个位点的基因型频率进行了检测,SNP-1296G/C采用PCR-RFLP的方法,SNP-727C/G和SNP-262G/A处采用了PCR-SSCP来鉴定基因型。研究发现,a2A-AR-1296G/C多态性位点的基因型频率和等位基因频率分布在脑水肿组和健康汉族工人组间有显著差别（P＜0.05）,其中高原脑水肿患者组GG基因型比例及G等位基因频率显著高于对照组;携带G等位基因的基因型是CC纯合型者发生高原脑水肿危险的3.79倍,且SNP-1296G/C基因型频率和等位基因频率分布在病例组和藏族工人组间也有显著差别;,携带G等位基因的基因型是CC纯合型者发生高原脑水肿危险的4.85倍。-1296G/C基因型频率和等位基因频率分布在汉族工人组和藏族工人组间无差别。SNP-727C/G基因型频率分布在病例组和对照组间无差别。SNP-262G/A的基因型频率和等位基因频率分布在病例组和藏族对照组间明显有差别（P＜0.05）,但在病例组和汉族工人对照组间无差别。由于SNP-262G/A的基因型频率和等位基因频率分布在藏族对照和汉族对照间有显著差异,提示a2A-AR-262G/A多态性位点的分布存在民族差异。研究结论综合以健康汉族工人和藏族工人为对照开展的病例-对照研究,可得出以下结论:中国人肾上腺素a2A受体基因启动子区-1296位SNP与高原脑水肿易感性相关,GG基因型和G等位基因位点可能是高原脑水肿易感的危险因素;SNP-262G/A多态性位点的分布在汉族和藏族间存在差异。不同种族由于多态性频率的差异形成了种族特异的遗传结构,因此,在不同的种族人群中对结果进行验证有着重要意义。