超声辅助碱预处理促进水稻OsCESA9基因编辑突变体高效酶解产糖的研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yyyypolo
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
水稻(Oryza sativa L.)是我国重要的粮食作物,其丰富的木质纤维素,可用于纤维乙醇和其它生物化学产品的生产。纤维乙醇的生产需要经过预处理、酶解产糖和发酵产醇三个主要步骤。然而,由于水稻细胞壁自身抗降解特性,木质纤维的酶解和乙醇的生产花费高、效率低,还会产生二次环境污染问题。因此,利用基因工程改良植物细胞壁结构,降低其抗降解性,并在绿色温和预处理下,提高木质纤维酶解产糖产醇效率是纤维乙醇发展的有效途径。本研究利用前期筛选的水稻次生壁合成纤维素合成相关OsCESA9基因编辑突变体材料,优化了木质纤维预处理方法和条件,解析了优质水稻突变体秸秆高效酶解产糖产醇的机理。主要研究结果如下:1.与野生型水稻(日本晴/NPB)相比,突变体(cesa9)水稻成熟秸秆中可直接用于酵母发酵产醇的可溶性糖提高了15%;突变体秸秆纤维素相对含量(%干物重)降低36%;与对照相比,突变体纤维素聚合度和纤维素结晶度分别降低33%和21%,纤维素表面可及性提高17%,在酶解产糖效率上更具优势。2.比较分析发现,2%H2SO4预处理可致使纤维素损失23%、原材料损失50%以上,致使水稻秸秆酶解产糖效率未能达到100%;超声预处理强度较弱,预处理后残渣木质素含量较高,对水稻秸秆酶解产糖效率提升不占优势;0.7%NaOH预处理和超声(固液比1:18,功率400 W,时间20 min)辅助0.5%Na OH可使突变体水稻秸秆完全酶解。3.结合XRD、SEM、FTIR等技术手段发现,水稻秸秆的高效酶解受多种因素影响;超声辅助0.5%Na OH预处理可以在不损失纤维素底物的基础上,降低14%-17%纤维素聚合度、去除非晶体区半纤维素和木质素、提高55%-75%纤维素表面可及性,从而促进水稻秸秆酶解效率的提高。4.使用优化后的超声辅助微碱预处理水稻秸秆材料进行后续酶解产糖和发酵产醇,发现突变体糖醇转化率为93%,比野生型提高7%;乙醇产量为55%(%纤维素),比野生型提高51%。综上所述,本研究提出了水稻秸秆绿色高效酶解产糖产醇路径模型:即上游利用基因工程改良植物细胞壁结构,使其抗降解性显著降低;下游通过简单超声辅助微碱预处理有效去除秸秆细胞壁半纤维素和木质素,使纤维素聚合度显著降低、纤维素表面可及性大幅增加,进一步提高了水稻秸秆酶解产糖产醇效率,为农作物秸秆的绿色高效综合利用提供技术与途径。
其他文献
再生稻又称为“一种两收”种植系统,具有较高的生产力和较低的农业投入成本等优势,被认为是可有效替代双季稻的绿色、高效生产系统。近年来,得益于一系列强再生力优良品种的问世和生产技术的改进,再生稻种植系统在华中地区的种植范围不断扩大。然而,目前在再生稻生产中主要应用普通水稻品种,受到水资源限制的较大制约。节水抗旱稻作为一类新型稻作品种,在增强水稻生产的抗旱性、节约水资源消耗和拓宽水稻种植范围上具有良好的
学位
“血液”般的资金以融资的方式输入,以投资的方式输出,以此来实现企业的可持续发展;银行贷款作为企业融资的重要来源,杠杆效应不言而喻,治理效应需多方论证。以资本市场中投资者对贷款公告的反应为债权监督作用的代表,发现了异于西方成熟市场的现象,我国上市公司贷款公告市场反应总体表现消极;背后原因大至经济环境政策干预,小至贷款规模类型期限,其真实动因或深至公司特质治理环境。贷款公告是贷款行为的融资宣告,贷款行
学位
经济的高速发展,直接带来居民消费水平的提高,由此导致的生活废弃物快速增加,引发环境问题与资源浪费并重。生活废弃物的总量大、种类多,如果能很好地加以管理并利用,会带来可观的经济价值和社会效益,提升居民生活品质。实施垃圾分类即是党中央在此背景下做出的重要决策。垃圾管理的最初目标是实现垃圾的无害化、减量化、资源化。如今无害化基本实现,减量与资源化随即成为垃圾管理的主要目标。垃圾管理的基础是垃圾分类,居民
学位
自交不亲和性是甘蓝型油菜杂种优势利用的主要途径之一,具有易筛选恢复系、育种周期短和产量高等优点。目前盐水繁殖油菜自交不亲和系得到广泛的应用,但其调控机制还不清楚。前期研究表明MAPK级联是是植物响应盐胁迫的重要途径,而且还调控拟南芥亲和授粉机制,其中MPK6是MAPK级联中的重要因子。油菜基因组中BnaMPK6有四个同源拷贝基因,为研究BnaMPK6基因功能,利用基因编辑技术创建了BnaMPK6四
学位
类黄酮是植物产生的一类活性物质,它参与到植物应对生物胁迫或非生物胁迫进程中,具有抗癌、抗氧化、抗紫外线等作用。小麦作为世界上第三大粮食作物,是全球大约三分之一人口的营养和能量来源。代谢物数量性状位点分析(mQTL)或代谢物全基因组关联研究(mGWAS)可以有效地解析复杂性状内在的遗传机制,已在一些农作物中得到应用。本研究以连锁群体(扬麦16和中麦895构建的173份双单倍体群体)和关联群体(159
学位
酚胺是植物中的一种次生代谢物,大多由BAHD家族的酶催化形成,广泛存在于禾本科、茄科等植物,能够抵御生物胁迫。目前小麦中对BAHD酶的研究较少,仅证实了3个基因(TaACT1-1/1-2/2)参与合成酚胺。本研究以一个包含368份品系的小麦自然群体为材料,通过液相色谱-质谱连用仪(LC-MS)检测小麦两叶一心期叶片中的9种酚胺含量。经过代谢全基因组关联分析(mGWAS)、基因注释及同源比对,我们共
学位
提高油菜产量和培育适合机械收获的品种是当前油菜育种的重要目标。通过改善现有品种的株型,使之适应高密度种植是实现上述目标的一种可能途径。ERECTA(简称ER)是拟南芥中一个编码类受体蛋白激酶的基因,其突变体(er)由于紧凑直立的株型受到研究者们的青睐。ER基因具有两个同源基因ERECTA LIKE1(ERL1)和ERECTA LIKE2(ERL2),目前对其基因家族(ERfs)的功能研究表明它们对
学位
棉花纤维由胚珠表皮的单细胞发育而来,是研究植物细胞伸长和细胞壁发育的良好材料。纤维细胞伸长伴随着初生细胞壁和次生细胞壁的合成,细胞壁性质能够决定成熟纤维的品质,因此解析细胞壁相关基因的功能对棉花纤维品质改良研究具有重要意义。植物中,Expansin蛋白是第一个被发现的细胞壁伸展蛋白,在植物发育过程中起着重要作用,酸性条件下可以介导细胞壁的松弛并促进细胞伸长。本实验前期对Expansin家族的蛋白进
学位
我国是世界上第三大盐碱地国家,土壤盐渍化是影响玉米生长发育的重要非生物胁迫之一。挖掘并鉴定耐盐相关基因,培育耐盐新品种,对保持玉米高产稳产以及开发、利用盐碱地具有至关重要的意义。实验室前期利用玉米叶片卷曲突变体caspl2b2材料,定位克隆了一个关键候选基因ZmCASPL2B2,并利用基因编辑技术创建了其等位突变体。本研究在此基础上,在水稻中过表达ZmCASPL2B2,发现其显著提高水稻耐盐性。利
学位
作物茎秆维管束作为“流”的重要载体,在光合产物运输和产量形成中发挥着重要作用。玉米穗位节间是指最大果穗着生节和节间,与果穗和穗位叶直接相连,其维管束显微表型的精准鉴定和遗传解析对于优良性状鉴定、高产优质品种选育具有重要意义。受限于观测手段和研究尺度,目前尚无系统、全面的有关玉米穗位节间显微表型获取及维管束遗传机制的研究。本研究以495份自交系构成的玉米关联分析群体为材料,利用Micro-CT扫描技
学位