稀有鮈鲫神经发育过程中分子标志物的筛选与功能初探

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神经发育毒性(Developmental Neural Toxicology,DNT)指的是个体在早期发育过程中,受到潜在神经毒性物质的暴露,影响神经系统正常的发育过程,如神经细胞的增殖、迁移、分化,突触形成,髓鞘形成等,这种影响可以发生在发育过程中的任何时期,并且产生持久的神经功能障碍。目前,随着科技的发展和生活水平的提高,越来越多的化学品不断出现,对于这些化学品神经发育毒性评价的重要性因此而凸显出来。作为重要的本土模式鱼类,稀有鮈鲫神经发育相关的生物学背景几乎空白,导致其在神经毒性评价方面的应用受到限制。本文以稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)为受试生物,采用RT-PCR技术,克隆了ngf、bdnf、gfap、mag和α1-tubulin基因的部分序列,研究了基因的在卵裂期(0.5hour post fertilization,0.5h),桑葚期(3.5h),囊胚期(5.5h),原肠胚期(10h),神经胚期(13.5h),肌节出现期(14.5h),眼基出现期(16h),眼晶体形成期(24h),心脏搏动期(30.5h),出膜(61h),4 dpf(day post fertilization),5dpf,6dpf,7dpf,10dpf,14dpf这16个阶段的发育表达图谱和脑、脊髓、眼、肝脏、性腺、鳃和肌肉的组织分布图谱。表达谱分析结果表明,ngf、bdnf、gfap、mag和α1-tubulin基因从卵裂期至14dpf过程中,表达量呈现不同的变化趋势,分别与各自在神经发育过程中行使的功能有关;ngf、bdnf、mag和α1-tubulin基因均在脑组织中表达量最高,gfap在脊髓中表达量最高。在有机磷农药毒死蜱(CPF)和有机磷酸酯磷酸三苯酯(TPP)暴露实验中,CPF和TPP对胚胎发育初期这5个基因的表达量影响比成鱼明显,当两者都作用于成鱼时,CPF的毒性影响高于TPP,gfap和mag可能成为潜在的生物标志物。上述结果为这一模式鱼类在神经发育学和神经毒性效应评价方面的应用以及神经发育毒性的机制研究奠定了基础。
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