目的:　　本实验通过观察钛片上成骨细胞生长状态;记录不同浓度bFGF，在不同时间点对成骨细胞MTT、ALP等的影响，研究不同浓度的bFGF对成骨细胞增殖、分化及成骨的影响并从中筛选出bFGF作用于成骨细胞的最佳浓度;运用western-blot法检测蛋白表达的变化，推测bFGF在钛表面促细胞分化、成骨的机制;通过本实验研究为进一步的动物实验及临床实验提供基础。　　方法:　　1.将成骨细胞接种于表面粗化处理的钛片上，体外进行复合培养。采用扫描电镜观察钛片表面形态及成骨细胞在钛表面生长情况;采用MTT法对比各组成骨细胞在第1至第5天细胞增殖情况;检测第4天，第8天及第12天各组ALP的活性;检测第6天，第12天，第18天及第24天各组OC的OD值。对各组实验数据进行对比分析得出促成骨细胞在钛表面增殖、分化及成骨的最佳bFGF浓度及将最佳bFGF浓度组与对照组的结果进行统计学分析。　　2.将成骨细胞接种于消毒的玻片及钛片上，体外进行培养。采用细胞免疫荧光法，镜下观察对比最佳bFGF浓度组与对照组Runx2、OPG及BMP-2蛋白的荧光强度并摄片;采用western-blot法观察各组Runx2、OPG、BMP-2、p-Akt及Akt蛋白条带及在各组中添加PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002后各个蛋白的条带变化。对最佳bFGF浓度组及对照组的蛋白条带结果进行统计学分析。　　结果:　　1.通过扫描电镜的镜下观察，处理过的钛片表面粗糙、高低不平。通过成骨细胞在钛表面的镜下观察，见细胞在钛表面生长良好，粗糙的钛表面有利于成骨细胞的早期附着及铺展。成骨细胞在粘附及铺展完成期间基本可见三种形态，且成骨细胞在24h内基本完成粘附，48h后可以完成细胞的铺展并发挥其作用。　　2.细胞增殖情况:成骨细胞在钛表面第1至第5天的MTT吸光值（OD值），间接反映了细胞的增殖情况。bFGF组OD值高于对照组，10ng/ml至40ng/ml浓度的bFGF组的OD值随着时间的增加呈现递增的趋势，40ng/mlbFGF浓度的OD值达到最大，随后呈现递减的趋势。因此，40ng/mlbFGF浓度在钛片上促细胞增殖的效果最佳且高剂量的bFGF浓度对成骨细胞反而出现一定程度的抑制。　　3.细胞分化及成骨作用的情况:各组在第8天时对成骨细胞促分化的作用强于其他时间点，且无论在任何时间点bFGF实验组ALP活性均大于对照组。各浓度中，以40ng/ml浓度作用效果最佳。根据骨钙素检测的结果得出，在各组中第18天时骨钙素分泌含量达最大值，且bFGF实验组大于对照组。各bFGF浓度中，以40ng/ml作用效果最佳。ALP及OCN检测结果与MTT结果一致且将ALP及OC的40ng/mlbFGF组与对照组的实验结果进行统计学分析后，都具有统计学意义(P＜0.05)。　　4.根据细胞免疫荧光实验结果，40ng/mlbFGF组的Runx2，OPG及BMP-2蛋白信号强度大于对照组且镜下细胞数量多于对照组。镜下发现，40ng/mlbFGF组的成骨细胞形态发生变化，与对照组相比，细胞形态呈梭形且更加细长。对于western-blot实验，40ng/ml浓度的bFGF作用下，Runx2,OPG，BMP-2与p-Akt蛋白表达均大于其他组，且bFGF组大于对照组。因此，bFGF能促成骨细胞在钛片分泌蛋白，40ng/ml的浓度效果最佳。根据40ng/mlbFGF实验组与对照组的各个蛋白的实验结果，进行统计学分析后均具有统计学意义(P＜0.05)　　5.在各组中加PI3K/Akt信号通路的抑制剂LY294002后，通过western-blot法检测，Runx2，OPG，BMP-2与p-Akt蛋白表达均被抑制，其中40ng/mlbFGF组抑制最为明显，且与对照组比有统计学意义(P＜0.05)。　　结论:　　1.bFGF能促进成骨细胞在钛表面的增殖、分化及成骨的作用且能促进成骨细胞分泌相关蛋白。其中40ng/ml浓度的bFGF作用效果最佳。　　2.bFGF能通过激活PI3K/Akt信号通路增强成骨细胞在钛表面的分化及成骨作用。