【摘 要】
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乙型肝炎病毒感染目前依然是一个严重的公共卫生问题,全球近2.6亿人为慢性乙肝患者,每年造成80余万人死亡,是引发肝癌的首要因素。尽管目前乙肝已经有多种诊断方法,包括“两对半”、核酸以及核酸相关抗原检测,但由于慢性乙肝患者病情的反复及病毒突变,目前可用于乙肝患者病情监测及预后的标志物仍十分有限。因此,寻找其他合适的靶标对慢性乙肝患者的病毒活动、病情进展及治疗结局进行实时监测具有重要意义。乙肝病毒核心
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乙型肝炎病毒感染目前依然是一个严重的公共卫生问题,全球近2.6亿人为慢性乙肝患者,每年造成80余万人死亡,是引发肝癌的首要因素。尽管目前乙肝已经有多种诊断方法,包括“两对半”、核酸以及核酸相关抗原检测,但由于慢性乙肝患者病情的反复及病毒突变,目前可用于乙肝患者病情监测及预后的标志物仍十分有限。因此,寻找其他合适的靶标对慢性乙肝患者的病毒活动、病情进展及治疗结局进行实时监测具有重要意义。乙肝病毒核心抗原（HBcAg）几乎参与HBV病毒活动的每个环节,对cccDNA转录调控具有重要作用,且与血清中的HBVDNA具有一定的相关性,在一定程度上可反应HBV病毒的活动状态。除此之外,HBcAg还通过作用于肝脏细胞内相关信号通路参与肝癌的发生发展及抑制机体的免疫应答。因此,HBcAg可能是一个潜在的乙肝病情监测、预后以及肝癌发生风险的标志物。但由于HBcAg位于包膜内部,且与HBeAg的高度同源性,目前尚未开发出特异性检测HBcAg的试剂,其临床意义目前仍不清楚。本研究通过HBV核心抗原及其特异性多肽aa150-183进行免疫,筛选HBcAg特异性抗体,并对裂解体系进行优化,基于磁微粒化学发光法建立了 HBcAg检测试剂。该试剂检测HBcAg重组蛋白的分析灵敏度可达20 pg/mL,检测HBV感染者血清标本的灵敏度可达104 copies/mL,且与HBeAg无任何交叉反应。在临床标本检测中,其对HBV病毒载量104 copies/mL及以上标本的检出率为100%,此外,HBcAg水平与病毒载量呈正相关,R2=0.9607,且在HBeAg阳性和HBeAg阴性患者标本检测中无显著差异。综上所述,我们成功建立了一种基于双抗体夹心的HBcAg定量检测体系,为后续进一步HBcAg在慢性乙肝及肝癌发生发展中的变化及其临床意义奠定了基础,对于HBV的防治具有重要意义。
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