白沙蒿铁蛋白基因对烟草的遗传转化及其抗旱性检测

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白沙蒿(Artemisia sphaerocephala),是我国荒漠半荒漠地区的特有植物,是沙地植被主要的优势种和建群种。铁蛋白(Ferrtin),广泛存在于生物体内,是一种具抗氧化功能的多亚基蛋白。本研究利用本实验室已经克隆的白沙蒿铁蛋白基因(AsFer)cDNA序列,构建单价表达载体pCAMBIA1301-AsFer,通过农杆菌介导法获得转基因烟草,并对其进行抗旱性研究,以野生白沙蒿为试验材料,研究其在干旱胁迫处理下生理变化。主要结果如下:1.构建单价表达载pCAMBIAI1301-AsFer。采用冻融法导入根癌农杆菌感受态GV3301后,利用农杆菌介导法导入烟草NC89,通过组织培养和抗性筛选获得转基因阳性植株。2.转基因烟草和野生型烟草进行干旱胁迫试验,结果表明:干旱胁迫条件下,第6d时,转基因烟草相对电导率和丙二醛、脯氨酸、氧自由基及过氧化氢含量显著(P<0.05)低于野生型烟草,表明转白沙蒿铁蛋白基因烟草在干旱胁迫下遭受的氧化损伤轻于野生型烟草。3.随着干旱胁迫时间的延长,白沙蒿植株电导率、脯氨酸、MDA、氧自由基、过氧化氢含量均呈上升趋势,于第6d达到最大值且显著高于对照(P<0.05);复水后,这些指标均呈降低趋势,恢复至对照水平。白沙蒿铁蛋白含量逐渐下降,于处理第4d出现最小值,第6d迅速增加;复水后,含量上升后恢复处理前水平。
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