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研究背景:
miRNA是真核生物中一类长度约为22个核苷酸的参与基因转录后水平调控的非编码单链RNA。miRNA表达改变与肿瘤的发生发展密切相关,其作用具有广泛性和复杂性,已经发现的人类miRNA大部分(52%)位于已知的肿瘤相关基因组区域内或已知的基因脆性位点,可能同时具有癌基因和抑癌基因的双重作用。越来越多的与细胞分化成熟障碍、增殖失控、细胞永生化为本质的肿瘤疾病密切相关的miRNA被发现,人类肿瘤细胞和肿瘤组织内miRNA的表达水平和类型都与正常细胞和组织的miRNA表达水平明显不同,miRNA及其调控的编码基因产物控制着多种肿瘤发生发展的基本信号通路,初步揭示了miRNA在阐明肿瘤发生机制、诊断和预后的生物学标记和治疗靶点等方面发挥着重要作用,进而可能为肿瘤治疗提供一个新的切入点。子宫内膜癌是威胁妇女健康的三大妇科恶性肿瘤之一,约占女性癌症总数的7%,占女性生殖道恶性肿瘤的20%~30%,高发年龄为58~61岁,近年来其发病率在各年龄层妇女中均呈上升趋势,并逐渐年轻化。子宫内膜癌发生机制复杂,其确切病因及发病机制尚未完全明了。因此,研究miRNA在子宫内膜癌发生发展中的作用对进一步从分子水平探讨子宫内膜癌的发病机制具有非常重要的意义。
研究目的:
1.筛选子宫内膜腺癌癌灶与癌旁组织中差异表达的miRNA。
2.在差异表达的miRNA基础上,预测与子宫内膜腺癌相关的miRNA靶基因,为进一步研究子宫内膜腺癌的发病机理提供理论依据。
研究方法:
选取首都医科大学附属北京妇产医院肿瘤科2008年1月至10月子宫内膜腺癌患者手术切除标本,在标本离体30min内分别收集子宫内膜腺癌病变部位、距肿瘤基底部2cm及以外内膜组织,液氮速冻。提取总RNA,采用含有miRNA探针的芯片检测系统进行miRNA表达谱差异分析。以TargetScanHuman5.0软件预测子宫内膜腺癌中差异miRNA的靶基因。
结果:
1.成功提取子宫内膜腺癌癌灶及癌旁内膜组织中的总RNA。
2.筛选出子宫内膜腺癌与癌旁组织中存在显著差异的miRNA111个,其中癌组织中68个表达上调,43个表达下调。
3.运用TargetScanHuman5.0软件预测子宫内膜腺癌中差异miRNA的靶基因:PTEN、MMP—2/TIMP—2。
结论:
以miRNA微阵列为平台,筛选到与子宫内膜腺癌相关的差异表达miRNA,提示miRNA可能参与了子宫内膜腺癌的发生发展过程,为进一步揭示子宫内膜腺癌发病的分子机制提供了依据。