【摘 要】
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目的：采用中药脑脊液药理学的方法探讨加味温胆汤治疗AD的作用机制。方法：NG108-15细胞在37℃、体积分数为5％的CO培养箱中培养，Aβ溶解于双蒸水中，置于37℃培养箱中老化4d，使其寡聚，毒性增强，细胞被置于浓度为5μmol/L的Aβ中作用24h，建立起AD细胞模型。12只清洁级大耳白家兔购于华中科技大学同济医学院动物中心，将其随机分成两组，分别给与等量的加味温胆汤和生理盐水灌胃7d，末次给
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目的：采用中药脑脊液药理学的方法探讨加味温胆汤治疗AD的作用机制。
方法：NG108-15细胞在37℃、体积分数为5％的CO<,2>培养箱中培养，Aβ<,25～35>溶解于双蒸水中，置于37℃培养箱中老化4d，使其寡聚，毒性增强，细胞被置于浓度为5μmol/L的Aβ<,25～35>中作用24h，建立起AD细胞模型。12只清洁级大耳白家兔购于华中科技大学同济医学院动物中心，将其随机分成两组，分别给与等量的加味温胆汤和生理盐水灌胃7d，末次给药后1h内用水合氯醛将给药组白兔麻醉，1.2ml/kg，无菌条件下用7号注射针头从枕骨大孔处垂直进针，抽取清亮含药脑脊液。生理盐水组同样方法处理所得为空白脑脊液。将培养的细胞分为六组，空白对照组给与空白脑脊液，低、中、高剂量组分别给与浓度为5％、10％、20％的含药脑脊液处理24h，JNK抑制剂SP600125组在给与Aβ<,25～35>处理前先用25μmol/L的SP600125处理30min以阻断JNK信号转导通路。最后用免疫组细胞化学染色法检测磷酸化JNK和p53的表达以及流式细胞仪分析细胞周期的分布。
结果：模型组p-JNK和p53的表达均明显增高，经治疗后均显著降低。高剂量组与抑制剂组之间差异有统计学意义，高剂量组与空白组和高剂量组与模型组比较有极显著差异(P<0.01)。细胞在S期发生阻滞，在G<,2>/M期中，除了模型组外，其它组的细胞数均有不同程度的上升。
结论：JNK信号转导通路介导了Aβ<,25～35>诱导的细胞凋亡，加味温胆汤含药脑脊液可以下调p-JNK和p53的水平，促进细胞从S期转向G<,2>期，它在一定程度上可以中和部分Aβ的神经毒性，这可能和激活JNK信号转导通路和下调p53的表达有一定关系。
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