芦笋茎叶中黄酮类化合物和多糖的提取纯化研究

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从蔬菜原料中提取活性成分是蔬菜深加工发展的方向之一,不仅可以增加蔬菜产品的附加值,而且可以充分利用蔬菜生产过程中的废弃资源。芦笋是我国主要出口创汇蔬菜之一,其生产过程中有大量的茎叶被作为废料遗弃,造成了环境的污染并使资源流失。本论文研究了芦笋茎叶中黄酮类化合物和多糖的提取和纯化工艺,并分别进行了初步鉴定和药效学实验,为工业化生产提供了实践参数和理论依据。主要研究结果如下: 1.研究探索不同溶剂、原料颗粒大小以及提取技术对芦笋黄酮类化合物提取效果的影响,采用正交试验就热回流提取、微波法提取技术进行比较并作回归分析,建立了数学拟合模型。结果表明:回流法提取最佳工艺条件为:80℃、55%乙醇、每次提取1h、料液比1:15,模型为y=10.0565-0.9114X1+0.0094X12+58.0883X2-42.5978 X22+1.1965 X3-0.7377X32+6.0177X4-1.0244X42;微波法最佳工艺为:乙醇浓度80%,pH10,提取时间为5min,料液比1:25,数学模型y=-9.1803+1.6378X1-0.1509X12+4.5216X2-1.1894X22+6.9266X3+1.3543X4。就各种方法做横向比较,推荐以超声波热回流提取法作为芦笋黄酮类化合物提取的最佳方法。 2.采用大孔树脂法分离芦笋茎叶醇提物,研究了上样液浓度、吸附和洗脱速度及洗脱剂浓度梯度等对黄酮类化合物的影响,确定最佳的纯化工艺参数。结果显示:NKA-Ⅱ可以较好地分离芦笋茎叶醇提物,黄酮类化合物在该柱材料上的吸附率达87.56%,洗脱率高达98.79%,初步纯化后芦笋黄酮干含量由2.25%上升至11.3%。 3.试验研究了芦笋茎叶多糖常规提取工艺,分别考察了醇沉时间、醇沉浓度、分步醇沉及去蛋白方法等对多糖得率及纯度的影响。研究结果表明:芦笋多糖提取工艺以90℃、1:15料液比、提取3h(2次)为最佳;比较超声波和微波提取法,以微波法效果最佳,多糖提取率可达到1.988%。以80%乙醇在4℃沉淀9h可完全沉出提取液中多糖,选择Alcalase 3.0水解去蛋白,处理最佳条件为:0.001g/ml的剂量,50℃酶处理90min,去蛋白后多糖纯度从13.4%上升至19.02%。 4.采用分步醇沉和超滤技术初步分离纯化芦笋多糖,前者确定芦笋多糖主要分布在50%和80%醇沉部分,以50%沉出数量居多;后者测定芦笋多糖的分子量和进行定
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