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β-1，3-葡聚糖酶是一类能够特异作用于β-葡聚糖中β-1，3糖苷键的葡聚糖水解酶系。β-1，3-葡聚糖酶大体上可以分为两类：外切β-1，3-葡聚糖酶（EC3.2.1.58）和内切β-1，3-葡聚糖酶（EC3.2.1.6或EC3.2.1.39）。β-1，3-葡聚糖酶广泛分布和存在于病毒、细菌、丝状真菌、放射菌类、酵母、软体动物和高等植物中。在啤酒工业、饲料工业、医疗和植物抗病等方面有大量应用。
嗜热毛壳菌（Chaetomium thermophilum）是一种广泛分布的嗜热真菌，其生长上限温度很高，产生的嗜热酶在高温条件下具有很高的活性和稳定性，该菌在含有麦麸的培养基中，50℃条件下可以产生β-1，3-葡聚糖酶。目前已从该菌中分离纯化了热稳定的蛋白酶、几丁质酶和纤维素酶等，但未见该菌β-1，3-葡聚糖酶的完整报道。
本研究以嗜热毛壳菌为研究材料，根据已得到β-1，3-葡聚糖酶的中间片段，设计特异引物，通过RACE-PCR和热不对称交错PCR等方法，克隆了该β-1，3-葡聚糖酶的编码基因glu-n，全长cDNA2765bp，包含一个由786个氨基酸组成的开放阅读框。该基因cDNA已在GenBank中注册，登录号为GQ149728。
glu-n基因和酵母分泌型表达载体pPIC9K用SnaBⅠ和AvrⅡ双酶切后体外连接，构建酵母重组表达载体pPIC9K/glu-n，将重组表达质粒pPIC9K/glu-n用限制性内切酶SacⅠ（位于5AOX1区内）线性化后，采用电击法转化Pichia pastoris GS115酵母感受态细胞，于MD/MM平板上筛选His+Mut+表型的酵母转化子。经过PCR检测及G418抗性筛选得到多拷贝整合子，进行甲醇诱导培养。通过检测各转化子每隔24h的蛋白表达情况来筛选高效表达目的蛋白的工程菌株。筛选到表达酶活性最高的菌株4-60，甲醇诱导7d酶活性达到最高，达257.379U/mL。
表达的β-1，3-葡聚糖酶进行硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子层析获得了凝胶电泳均一的分子量约为94kDa的β-1，3-葡聚糖酶。表达β-1，3-葡聚糖酶GLU-N的最适反应温度和pH分别为60℃和5.0，70℃的保温60min仍具有60％的酶活性；在pH值为4.0～7.0之间保持稳定的酶活性。β-1，3-葡聚糖酶对轮枝镰孢菌（Fusarium verticillioide）、烟草赤星病菌（Alternaria alternata）的菌丝生长有一定的抑制作用。对嘴突凸脐蠕孢（Exserohilum rostratum）孢子萌发有一定的抑制作用。4.5h抑制率可达50％。
嗜热毛壳菌β-1，3-葡聚糖酶基因能在重组的毕赤酵母中分泌出具有生物活性的目的蛋白，而且表达产物有较好的热稳定性，这预示了重组GLU-N在生物学领域和工业的广阔应用前景。