【摘 要】
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目的视网膜微血管内皮细胞凋亡是糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的重要原因。miR-218在细胞增殖、分化及凋亡中发挥重要作用,但是否参与高浓度葡萄糖诱导的视网膜内皮细胞凋亡尚不清楚。本研究以大鼠视网膜微血管内皮细胞(rat retinal microvascular endothelial cells,rRMECs)为研究对象,探讨miR-218在高浓度葡萄糖诱导
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目的视网膜微血管内皮细胞凋亡是糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的重要原因。miR-218在细胞增殖、分化及凋亡中发挥重要作用,但是否参与高浓度葡萄糖诱导的视网膜内皮细胞凋亡尚不清楚。本研究以大鼠视网膜微血管内皮细胞(rat retinal microvascular endothelial cells,rRMECs)为研究对象,探讨miR-218在高浓度葡萄糖诱导rRMECs凋亡中的作用及机制,为DR的临床治疗提供参考。方法分四组培养rRMECs,对照组、高糖组、miR-218抑制组及miR-218阴性抑制组。对照组以DMEM低糖培养基培养,高糖组葡萄糖浓度为25 mmol/l,高糖组基础上给予miR-218阴性对照抑制剂或miR-218抑制剂即为miR-218阴性抑制组或miR-218抑制组。分组培养72 h后Real-time PCR检测各组miR-218含量,CCK-8试剂盒检测细胞活力,Hoechst染色观察rRMECs细胞凋亡并计数细胞凋亡率,Western blot检测Caspase-3的表达变化。结果对照组、高糖组、miR-218阴性抑制组、miR-218抑制组的miR-218相对表达量分别为1.00±0.08、1.48±0.12、1.46±0.14、1.03±0.08,细胞活力分别为100.00%、(72.3±7.5)%、(70.7±9.3)%及(98.4±9.4)%,细胞凋亡率分别为(2.3±0.0)%、(20.3±3.1)%、(23.1±3.2)%及(2.9±0.1)%,Caspase-3相对表达量为(18.6±2.3)%、(43.3±4.5)%、(41.6±3.9)%及(20.0±2.8)%。与对照组相比,高糖组与miR-218阴性抑制组的miR-218和Caspase-3含量升高,细胞活力下降,凋亡增加(P<0.01),miR-218抑制组各指标无显著变化(P>0.05)。结论高浓度葡萄糖能通过miRNA-218诱导rRMECs细胞凋亡,其机制可能与Caspase-3表达上调有关。
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