【摘 要】
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研究背景与目的:复发性流产是目前国际上产科及生殖科备受关注的问题,它不仅对生育年龄妇女的身体健康造成创伤,对其心理健康及家庭和谐也有影响,其发生率大约为1%～5%。RSA的病因复杂多样,其中有50%是原因不明的。蜕膜巨噬细胞是免疫耐受的关键细胞之一,介导免疫耐受,滋养细胞侵袭,血管生成和螺旋动脉重塑,吞噬凋亡细胞等。而PD-1/PD-L1介导免疫抑制信号（免疫检查点）,参与诱导免疫耐受、抑制免疫应
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研究背景与目的:复发性流产是目前国际上产科及生殖科备受关注的问题,它不仅对生育年龄妇女的身体健康造成创伤,对其心理健康及家庭和谐也有影响,其发生率大约为1%～5%。RSA的病因复杂多样,其中有50%是原因不明的。蜕膜巨噬细胞是免疫耐受的关键细胞之一,介导免疫耐受,滋养细胞侵袭,血管生成和螺旋动脉重塑,吞噬凋亡细胞等。而PD-1/PD-L1介导免疫抑制信号（免疫检查点）,参与诱导免疫耐受、抑制免疫应答、调节局部炎症和肿瘤免疫逃逸等多种生理和病理过程。本实验通过分析绒毛组织中PD-L1的表达,蜕膜组织中巨噬细胞及其表面PD-1的表达,PD-1/PD-L1对单核细胞分化的影响。研究方法:使用Western Bolt及qPCR技术检测绒毛组织中的PD-L1的蛋白及mRNA的表达情况;并使用流式细胞检测技术检测蜕膜组织中巨噬细胞的分类及其PD-1的表达情况;使用PMA诱导THP-1细胞,IL-4、LPS、IFN-γ诱导细胞分化,并通过设立空白组、刺激组（IL-4、LPS、IFN-γ）、PD-1阻断组（IL-4、LPS、IFN-γ、PD-1抗体）,并使用流式细胞检测细胞表面的分子来确定单核巨噬细胞的分化。研究结果:（1）Western Bolt及qPCR实验结果:两组绒毛组织中均表达PDL1,但复发性流产组中PD-L1的表达较正常组减少;（2）流式细胞检测结果:蜕膜组织中均表达M1和M2型巨噬细胞,正常组以M2型细胞为主,M2型中以CD163+CD206+为主,复发性流产组M1和M2无明显差异,两组M1型中均以CD80+为主,PD-1在两组均表达且无差异;（3）细胞分化:THP-1细胞经过刺激后表现为M1和M2型,其中M2型为主,在M2型中以CD206+为主,在M1型中以CD86+为主,加入PD-1阻断后,细胞中M1型的比例较刺激组上升,M2型的比例较刺激组下降,且差异均有统计学意义。研究结论:绒毛组织中有PD-L1的表达,而RSA组中PD-L1减少;早孕期蜕膜巨噬细胞中为M1和M2型混合型,以M2型为主,两型均表达PD-1,且PD-1的表达不受影响;阻断PD-1信号轴,可以改变单核巨噬细胞向M1型分化,不利于早期胚胎的发育。
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