拟南芥F-box蛋白LHR参与水杨酸介导的抗病反应和适应性生长调节机制的研究

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lzg31142003
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由于植物不能够移动,它们必须具备对多种生物和非生物胁迫进行响应的机制。本研究发现LHR(Leaf and Height Regulator)通过抑制水杨酸积累,而参与水杨酸介导的抗病反应和生长的调节。LHR/AtSFL75/CPR30编码一个 F-box蛋白,属于拟南芥AtSLF(S-locus F-box-like)基因家族。基因表达分析结果表明LHR组成型表达,且在维管组织中高表达。研究发现,T-DNA插入LHR导致其功能丧失的突变体出现矮化表型,将该基因转入突变体中,能互补突变体表型,证明该基因的突变导致矮化表型。对lhr突变体的叶片进行解剖分析,结果表明突变体叶片小是由于细胞体积减小引起的,提示 LHR在叶片发育中促进细胞延伸。为了研究该基因的作用机制,我们利用芯片分析和定量PCR比较了野生型和lhr突变体中基因表达差异,发现在突变体中与系统获得性抗性(SAR)相关的抗病基因表达上调,进一步的实验验证了lhr确实增强了对细菌有毒菌株 PstDC3000的抗性,提示突变体中水杨酸(SA)的含量可能有所增加。为了进一步验证这个可能性,我们在lhr突变体中表达了可以降低水杨酸含量的NahG基因后,发现可以将突变体矮化和抗病表型回复到野生型水平,证明了突变体表型的确是由于SA含量增加引起的。为了分析突变中SA含量增加的因为,我们对lhr与SA通路上的突变体pad4-1进行了遗传杂交分析,发现pad4-1 lhr表现为pad4-1表型,即生长正常且不抗病,表明LHR作用于PAD4上游,是SA积累的一个负调节子。为了验证LHR是否可以形成SCF复合体,我们进行了酵母双杂交实验,结果显示它可以与多个ASK蛋白互作,提示它可能形成多个SCF复合体参与泛素/26S蛋白酶体降解途径。为了寻找LHR的互作蛋白,我们以LHR为诱饵筛选拟南芥的酵母库发现它可与 At4g16360、RGL1和At2g04700发生相互作用,提示它们可能作为LHR的降解底物而参与调控SA积累。综上所述,LHR抑制SA积累,从而影响植物抗病反应和细胞延伸过程。
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