森林脑炎又称蜱传脑炎（tick-borne encephalitis,TBE）,是一种主要通过蜱虫叮咬感染蜱传脑炎病毒（tick-borne encephalitis virus,TBEV）的人兽共患性疾病。TBEV属于黄病毒科,感染后会使中枢神经系统发生病变,致死率最高可达35%,严重威胁人类的生活。随着西部大开发、退耕还林等政策的实施,蜱虫的活动区域扩大,感染TBE的风险也随之增大。目前我国使用的是以原代地鼠肾细胞为细胞基质的森林脑炎灭活纯化疫苗,具有良好的稳定性,但健康人群接种疫苗1年后的抗体水平出现明显下降,需要每年加强免疫。因此,对于不同细胞基质森林脑炎灭活疫苗的研究有着重要的现实意义。本课题采用人胚肺二倍体细胞（Human embryonic lung diploid cells,2BS细胞）代替原细胞基质制备森林脑炎灭活疫苗,并对其不同抗原含量的疫苗样品进行免疫原性研究。2BS细胞作为人源化细胞对多种病毒都很敏感,可替代动物细胞来增殖病毒,能够减少疫苗接种潜在的副反应,现被广泛应用于生产人用疫苗,经临床证明可显著提高疫苗的质量和安全。TBEV对2BS细胞有着较强的感染性,通过前期课题中的全基因序列测定及分子特性分析表明TBEV的2BS适应株有着良好的遗传稳定性。通过对不同抗原含量的2BS细胞森林脑炎灭活疫苗样品的效价测定发现,抗原含量为1:32和1:64疫苗样品组的免疫保护指数均符合药典中的规定,其中1:64疫苗样品组的效价更高。通过蚀斑减少中和试验法对免疫后的小鼠血清进行检测发现,小鼠血清细胞板中的蚀斑数明显比阳性对照要少,值得注意的是,1:64疫苗样品组在初次免疫后第21天的血清效价可达1:32并维持此效价一段时间,说明免疫后的小鼠血清中存在抗TBEV的抗体。通过ELISA法对小鼠血清进行检测发现,免疫前后小鼠血清中白细胞介素-2（Interleukin-2,IL-2）和Ⅱ型干扰素（Interferon-γ,IFN-γ）的含量存在明显差异;小鼠血清中的IL-2含量随着免疫次数的增加而逐渐加强,其中抗原含量为1:64疫苗样品组的数值最高;小鼠血清中的IFN-γ含量在初次免疫后第10天时出现最高值,后随着时间逐渐下降,其中抗原含量为1:64疫苗样品组的数值略高于其他组。综上所述,2BS细胞森林脑炎灭活疫苗的免疫原性可以通过ELISA法、动物实验效价法和蚀斑减少中和试验法进行检测,其中抗原含量为1:64的2BS细胞森林脑炎灭活疫苗样品的免疫原性效果最好。本课题将对2BS细胞森林脑炎灭活疫苗的免疫原性进行相关研究,希望能为防治TBE提供新依据和新方法,控制TBE的传播,节约医疗卫生资源,减少TBE对人类健康的威胁,同时也为研制不同类型细胞基质的森林脑炎疫苗奠定基础。