【摘 要】
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目的:研究基质金属蛋白酶-13在胆道闭锁肝脏中的表达与肝脏纤维化分期、肝功能、肝纤维化血清学模型以及术后黄疸下降率之间的关系,为预测胆道闭锁肝纤维化和预后提供依据。方法:首先选择了存档在遵义医科大学附属医院并接受治疗的56例胆道闭锁和12例先天性胆管扩张症患儿肝脏组织作为本次研究的观察组和对照组,HE染色后,根据Metavir标准进行肝脏纤维化分期,利用免疫组化法检测肝组织基质金属蛋白酶-13的表
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目的:研究基质金属蛋白酶-13在胆道闭锁肝脏中的表达与肝脏纤维化分期、肝功能、肝纤维化血清学模型以及术后黄疸下降率之间的关系,为预测胆道闭锁肝纤维化和预后提供依据。方法:首先选择了存档在遵义医科大学附属医院并接受治疗的56例胆道闭锁和12例先天性胆管扩张症患儿肝脏组织作为本次研究的观察组和对照组,HE染色后,根据Metavir标准进行肝脏纤维化分期,利用免疫组化法检测肝组织基质金属蛋白酶-13的表达并半定量分析,观察对照组、各纤维化分期肝组织中基质金属蛋白酶-13蛋白的表达。收集肝功能和血常规并计算血清学模型APRI、GPR、S指数,分析其与基质金属蛋白酶-13蛋白的相关性。按照纤维化进程,分成无进展性肝纤维化组（F＜3）和进展性肝纤维化组（F≥3）,无肝硬化（F＜4）和肝硬化组（F=4）,根据受试者工作特征曲线下面积来判断基质金属蛋白酶-13对肝纤维化分期预测概率的临床价值,并通过约登指数找到最佳临界值。收集患者手术日龄,将胆道闭锁患儿分为＜60天、60～90天、＞90天三组,分析不同手术日龄BA患儿肝脏中MMP-13的表达情况;随访患者术后3个月、6个月总胆红素降低水平,进行MMP-13的表达、手术日龄及纤维化分期与Kasai手术后黄疸下降率相关性分析。结果:根据Metavir标准分期重新阅片确诊,将56例胆道闭锁患儿分为F0（0例）、F1（0例）、F2（7例）、F3（11例）、F4（38例）。F2、F3、F4期肝组织中基质金属蛋白酶-13蛋白表达均高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.001）,F2、F3、F4肝组织中基质金属蛋白酶-13的平均光密度值随着肝纤维化的进展逐渐升高,两两组间比较后差异均有统计学意义。基质金属蛋白酶-13预测进展性肝纤维化（F≥3）的曲线下面积为0.942（95%CI:0.872-1.000）,最佳临界值为99.28,灵敏度:79.59%,特异度:100%,阴性预测值:41.17%,阳性预测值:100%。基质金属蛋白酶-13预测肝硬化（F=4）的曲线下面积为0.721（95%CI:0.585-0.857）,最佳临界点为107.9,灵敏度:71.05%,特异度:66.67%,阴性预测值:52.17%;阳性预测值:81.82%。基质金属蛋白酶-13的平均光密度值与TBIL、DBIL、TBA呈正相关,其相关性具有统计学意义（P＜0.001）;与ALP、GGT、IBIL呈正相关,其相关性具有统计学意义（P＜0.05）;基质金属蛋白酶-13的平均光密度值与PA呈负相关,r值为-0.284,P=0.019,有统计学意义;与ALT、AST、AAR、CHE、TP、ALB、GLB、A/G相关性无统计学意义（P＞0.05）。血清学模型中,发现基质金属蛋白酶-13的平均光密度值与APRI相关性无统计学意义（r=0.115,P=0.352）,与GPR、S指数呈正相关,有统计学意义（P＜0.05）。＜60天、60～90天、＞90天三组肝组织中MMP-13均高于对照组,其差异有统计学意义（P＜0.001）。BA患儿肝组织中MMP-13随着手术日龄增加而逐渐升高,组间两两比较后,发现差异均有统计学意义（P＜0.001）。肝纤维化分期与手术日龄进行Spearman相关性分析发现,肝纤维化分期与手术日龄存在正相关,相关系数为0.380,有统计学意义（P=0.001）。MMP-13与术后3个月TBIL下降率呈负相关（r=-0.830,P＜0.001）,术后3个月总胆红素下降率最低为9.1%,最高为94.7%;MMP-13与术后6个月TBIL下降率呈负相关（r=-0.693,P=0.004）,术后6个月总胆红素下降率最低为14.3%,最高为95.6%。观察到手术日龄与术后3个月黄疸下降率呈负相关,相关系数为-0.629,有统计学意义（P＜0.001）;与术后6个月黄疸下降率呈负相关,相关系数为-0.677,有统计学意义（P=0.006）。将手术时肝脏纤维化程度与术后黄疸下降率进行Spearman相关性分析后发现,手术时的纤维分期与术后3个月黄疸下降率呈负相关,相关系数为-0.445,有统计学意义（P=0.016）;与术后6个月黄疸下降率呈负相关,相关系数为-0.576,有统计学意义（P=0.025）。结论:MMP-13在胆道闭锁患儿肝中表达明显增加,MMP-13可作为胆道闭锁患儿术后肝纤维化的预测指标。MMP-13在胆道闭锁患儿肝中的表达与肝纤维化血清学模型GPR呈正相关,MMP-13是胆道闭锁肝纤维化程度的诊断依据之一。Kasai手术日龄越大,MMP-13在胆道闭锁患儿肝中表达越高;MMP-13在胆道闭锁患儿肝中表达越高,术后3个月、6个月黄疸下降率越低。
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