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目的:通过PCR-反向点杂交法研究吉林大学第一医院因消化道症状就诊患者的胃黏膜和唾液幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)主要毒力基因类型及Hp的耐药情况,并比较胃黏膜和唾液标本检测的异同。方法:对在吉林大学第一医院内镜中心行胃镜检查患者的胃黏膜组织行快速尿素酶试验,收集快速尿素酶试验阳性的169例患者的胃黏膜活检标本和其中100例患者的唾液标本。应用PCR-反向点杂交技术检测Hp的DNA、主要毒力基因分型及Hp对5种抗菌药物的耐药突变基因。结果:1、吉林大学第一医院诊疗中心Hp感染和耐药情况:(1)169例胃黏膜标本的Hp DNA阳性率为69.2%(117/169)。(2)vac A基因型共检测到3种:分别为s1m1(37.6%),s1m2(59.8%),同时具有s1m1、s1m2(2.6%),vac A基因类型与疾病类型之间的差异无统计学意义(P>0.05)。(3)117例阳性的胃黏膜标本中,克拉霉素耐药率为71.8%(84/117);左氧氟沙星为41.9%(49/117);甲硝唑为35%(41/117);四环素为17.1%(20/117);阿莫西林为4.3%(5/117)。(4)5种抗菌药物的耐药模式:单一耐药率为26.5%,克拉霉素最高(14.5%);二重耐药率为35.9%,克拉霉素+左氧氟沙星组最高(17.1%);多重耐药率为23.9%,克拉霉素+左氧氟沙星+甲硝唑组最高(11.1%)。(5)男性患者甲硝唑的耐药率高于女性,差异具有统计学意义(P=0.006)。不同年龄组克拉霉素、甲硝唑、左氧氟沙星及四环素的耐药率不同,差异有统计学意义(P<0.05),克拉霉素、左氧氟沙星及四环素的耐药率具有高年龄组>低年龄组的特点。不同疾病的克拉霉素、甲硝唑、左氧氟沙星及四环素的耐药率不同,非萎缩性胃炎的耐药率最高,差异有统计学意义(P<0.05)。(6)本中心Hp对阿莫西林耐药基因pbp1的突变位点主要是T556S(80%),对克拉霉素耐药基因23Sr RNA的突变位点主要是A2143G(97.6%),对甲硝唑耐药基因rdx A的突变位点是G616A(100%),对左氧氟沙星耐药基因gyr A的突变位点主要是D91G(38.8%)和N87K(30.6%),对四环素耐药基因16Sr RNA的突变位点主要是AG926-927GT(65%)。2、100例患者的胃黏膜和唾液标本Hp感染和耐药情况比较:(1)胃黏膜标本Hp DNA阳性率为77.0%(77/100),唾液标本为39.0%(39/100),差异有统计学意义(P<0.001)。(2)胃黏膜vac A基因型检测的阳性率s1m1为35.1%(27/77),s1m2为62.3%(48/77),同时具有s1m1、s1m2为2.6%(2/77);唾液标本s1m1为38.5%(15/39),s1m2为61.5%(24/39),胃黏膜和唾液标本的各vac A基因型检测阳性率无统计学差异(P>0.05)。(3)胃黏膜和唾液标本的耐药率分别为90.9%(70/77)和92.3%(36/39),二者耐药率无统计学差异(P>0.05)。胃黏膜和唾液的Hp单一、二重和多重耐药率无统计学差异(P均>0.05)。(4)胃黏膜和唾液标本Hp对各抗菌药物耐药的基因主要突变位点均为:T556S、A2143G、G616A、D91G、N87K、AG926-927GT。胃黏膜和唾液标本的耐药基因突变率无统计学差异(P>0.05)。(5)38例胃黏膜与唾液标本同时检测到Hp,且vac A基因分型完全一致,突变位点一致率为68.4%(26/38)。1例患者胃黏膜标本检测Hp阴性,而唾液标本Hp检测阳性。结论:1、吉林大学第一医院就诊患者胃内Hpvac A基因型主要为s1m1和s1m2,毒力较强,基因型和疾病类型无关,个别患者同时存在s1m1和s1m2,提示存在Hp混合感染。Hp对克拉霉素、甲硝唑、左氧氟沙星耐药率高。男性患者的甲硝唑耐药率高。高年龄组的克拉霉素、左氧氟沙星及四环素耐药率高。除阿莫西林外,非萎缩性胃炎患者的各抗菌药物耐药率高。Hp耐药模式多样,二重及多重耐药率高,耐药问题严峻。本中心就诊患者的Hp对各抗菌药物耐药基因的主要突变位点为:T556S、A2143G、G616A、D91G、N87K、AG926-927GT。2、胃和唾液中的Hp耐药率、耐药基因突变率没有差异。胃黏膜与唾液标本检测的Hp耐药基因突变位点不完全一致。胃黏膜标本Hp的检出率明显高于唾液,但是存在胃黏膜标本Hp检测阴性而唾液检测阳性的情况,胃和唾液Hp联合检测可以提高患者Hp的检出率。